ГОСТ 7636-85 С. 82
ку пата свежими порциями растворителя повторяют 2—3 раза до тех пор, пока капля цептрифугата.
нанесенная на фильтровальную бумагу, после испарения не будет остаатять следов нитролака. Пос ле
этого растворитель сливают, а гуанин подсушивают на водяной бане для удаления ацетона.
Гуанин из пробирки количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 см* неболь
шими порциями раствора 1 моль/дм’ гидроксида натрия. Для лучшего растворения гуанина колбу
подогревают на водяной бане при температуре 70 *С в течение 5—10 мин. Раствор охлаждают до
комнатной температуры и доводят объем до метки раствором гидроксида натрия 1моль/дм*.
0,2—0,3 см* полученного раствора разбавляют раствором гидроксида натрия I моль/дм* до
10 см*, тщательно перемешивают, заливают в кювету с рабочей длиной 10 мм и определяют
оптическую плотность при длине волны 275 нм по отношению к раствору гидроксида
натрия ! моль/дм*.
Содержание гуанина, соответстующее определенной оптической плотности, рассчитывают по
градуировочному графику.
13.3.1.1.4. Построениеградуировочногографика
Гуанин предварительно обрабатывают следующим обраюм: 5-10 гсырого гуанина разбавляют
бензином в соотношении 1:10 и центрифугируют. Центрифугат сливают, а обработку повторяют
сначала бензином, а затем смесью бензина с хлороформом.
Для более полного разделения суспензии при центрифугировании смесь растворителей долж
на иметь плотность не более 1300 кг/м1.
Очищенный гуанин подсушивают на водяной бане для удаления растворителей, а затем в
сушильном шкафу до постоянной массы при температуре 100-105 *С. Хранят гуанин в склянке с
притертой пробкой из темного стекла.
Для приготовления стандартных растворов навеску очищенного гуанина 25 мг, взвешенную с
абсолютной погрешностью не более 0,001 г, помешают в мерную колбу вместимостью 200 см1,
приливают раствор гидроксида натрия 1моль/дм3 при подогревании на водяной бане темпера
турой 70 ‘С.
После охлаждения содержимого до комнатной температуры объем в колбе доводят до метки
раствором гидроксида натрия 1моль/дм*. Хранят раствор не более 3 сут в прохладном, защищенном от
света месте.
1см* приготовленного раствора содержит 0,125 мг гуанина.
Для построения градуировочного графика готовят серию растворов с различным содержанием
гуанина в 1см*. Соотношение стандартного раствора и гидроксида натрия приведено втабл. 12.
Т а б л и ц а12
Количестно
гуанина п
приготовленном
риспюре.
Mi/10 см’
Количеств
стандартною
растора гуанина.
см1
Количеств
добавляемой
щелочи. см:
Количеств
гуанина л
приготовленном
растворе,
ш/10 см’
Количество
стандартною
раствора папина,
см’
Количество
лоблвлнемой
щелочи, ем’
0,150
0.175
0,200
0.225
0,250
1,2
1.4
1.6
1,8
2,0
8.8
8.6
8.4
8.2
8.0
0,012
0.025
0.050
0.075
0,100
0.125
0,1
0,2
0.4
0,6
0,8
1,0
9.9
9.8
9.6
9.4
9.2
9.0
Хранят серию приготовленных растворов не более 3 сут втемном прохладном месте.
Градуировочный график строят не реже двух раз в год.
Оптическую плотность серии растворов определяют против раствора гидроксида натрия
1моль/дм3в кювете с рабочей длиной 10 мм. По полученным данным строят градуировочный график,
откладывая на оси абсцисс содержание гуанина, на оси ординат - соответствующие оптические
плотности.
119