ГОСТ ИСО 10993-7— 2016
Образцы подвергают экстракции в течение времени, равного или превышающего наибольшее время контак
та изделия с пациентом при однократном применении, и выбирают температуру экстракции, которая предоставит
наибольшую моделированную нагрузку в соответствии с п. 4.4.6.2. В качестве альтернативного метода готовят
серию экстрактов (рекомендуется как минимум три), соответствующих нескольким более коротким периодам вре
мени. и используют скорость экстракции для вычисления влияния при более длительном или многократном воз
действии.
Если анализ не проводят сразу, декантируют экстракт во флакон и хранят, закрыв пробкой с прокладкой,
покрытой ПТФЭ. Пространство, занятое равновесным паром, во флаконе с контрольным раствором или экстрак том
должно быть менее 10 % общего объема. Экстракт хранят в холодильной камере при температуре (5 ± 3) *С.
Исследователь должен установить срок годности и хранения. Когда для определения ЭО используют водные экс
тракты. соблюдают меры предосторожности, так как в процессе хранения водного экстракта [35], ЭО может пре
вратиться в ЭГ или ЭХГ. или в оба этих продукта.
К.4.3 Методика исчерпывающей экстракции при повышенной температуре
Взвешивают 1г образца с погрешностью 0.1 мг и помещают его во флакон с пробкой. Помещают герметично
закрытый флакон 8 термошкаф, нагретый до подходящей температуры, и термостатируют в течение подходящего
периода времени. Режим времени и температуры относительно произволен. Варьируют время для достижения
равновесия парциального давления ЭО с паровой фазой.
Вынимают флакон из термошкафа. Вводят 100 мкл пробы равновесной паровой фазы в колонку хромато
графа (анализ повторяют дважды) и определяют высоты и площади пиков, соответствующих ЭО. Рассчитывают
среднее значение для двух измерений.
П р и м е ч а н и е — Следует быть осторожным. При введении пробы игла не должна соприкасаться с на
полнителем колонки. Опыт показал, что анализ горячих образцов сразу после того, как они были удалены из тер
мошкафа. часто приводит к ошибке более 20 % из-за потери материала в шприце, так как при удалении шприца из
флакона давление в шприце уравновешивается с атмосферным давлением. Некоторые материалы ресорбируют
ЭО во время уравновешивания их температуры с комнатной. Существуют также некоторые материалы, которые
полностью ресорбируют ЭО при охлаждении. При проведении анализа таких материалов может оказаться необ
ходимым вводить исследуемые образцы и контрольные растворы в колонку хроматографа, пока они еще горячие
или теплые, а затем прокачать шприц (как описано выше) без дальнейшего охлаждения.
Коммерчески доступны автоматизированные анализаторы равновесной паровой фазы. Тем не менее эту
процедуру можно выполнить вручную.
Используя вытяжной шкаф, удаляют крышку с флакона и продувают его в течение 30 с сухим азотом. Ис
пользуя новую мембрану, снова закатывают крышку и повторяют нагревание и ввод пробы до полного извлечения
ЭО. Полное извлечение достигается, когда экстрагируемое количество ЭО составляет менее 10 % полученного при
первой экстракции или когда нет аналитически значимого увеличения в обнаруженных кумулятивных уровнях
осадка. С использованием калибровочного графика рассчитывают количество ЭО в образце, суммируя количества
ЭО. полученные для средних значений измерений площадей или высот пиков при каждом из нескольких нагрева ний
образца.
К.4.4 Исчерпывающая экстракция этиловым спиртом с последующим анализом этанольных экстрак
тов методом равновесной паровой фазы
К.4.4.1 Контрольные растворы для построения калибровочного графика
Готовят контрольные растворы, разбавляя ЭО в этиловом спирте таким образом, чтобы получить растворы с
концентрацией ЭО 0.4: 0.8: 1,2; 1.6 и 2 мкг/мл. Готовят контрольный раствор ПО в этиловом спирте концентрацией 0.5
мкг/мл в соответствии с К.3.3. Охлаждают эти растворы и соответствующее число специальных флаконов для
анализа методом равновесной паровой фазы (см. рисунок К.1) в бане, заполненной смесью сухого льда с иэопро-
панолом. или аналогичным образом. Переносят соответствующие аликвоты каждого контрольного раствора ЭО и
те же самые объемы контрольного раствора ПО во флаконы для проведения анализа методом равновесной
паровой фазы. Флаконы термостатируют при температуре 70 ”С в течение 30 мин и вводят от 100 мкл до 1 мл
аликвот равновесной паровой фазы из каждого флакона в колонку газового хроматографа (анализ проводят дваж
ды). Чтобы получить калибровочный график, измеряют высоты или площади пиков ЭО и ПО и строят зависимость
отношения высот или площадей пиков (ось
X
) от концентрации ЭО.
Добавление ПО к контрольным растворам ЭО используют как внутренний стандартдля оценки точности при
готовления контрольных растворов ЭО. Построение соотношения ЭО.’ПО против намеченных концентраций ЭО в
контрольных растворах в идеале приведет к коэффициенту линейной корреляции г. составляющему 1.000. и ли
нейному уравнению у = 0,5х + 0. Такие параметры обозначают абсолютно прямую калибровочную линию, которая
имеет наклон в 0.5 с нулевой точкой пересечения с осью У. Можно использовать коэффициент корреляции в 0.999
или лучше. Линейный наклон выше 0.5 с нулевой точкой пересечения с осью У означает, что все контрольные рас
творы ЭО были ниже, чем намеченные концентрации. Наклон менее чем 0.5 с нулевой точкой пересечения с осью У
означает, что все контрольные растворы ЭО были выше, чем намечено. Следует обратить внимание, что кали
бровочные линии с точкой пересечения с осью У выше или ниже нуля приведут к результатам образца ЭО, которые
выше или ниже, чем реальная концентрация, соответственно, особенно при более низких результатах образца ЭО.
Степень неточности зависит от расстояния оси У от нуля. Наконец, высота или площадь самого пика ЭО должна
58