ГОСТ Р 53244— 2008
П р и м е ч а н и е — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылоч
ных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального
агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому
информа ционному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января
текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным
в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом
следует руководство ваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без
замены, то положение, в ко тором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Термины и определения
В
н
асто
ящ
е
м ста
н
дарт
е
п
р
и
м
е
н
е
ны
т
е
рм
ины
п
о ГО
С
Т
Р
50779
.
11
и
ГО
С
Т
Р
53214
.
4 Принцип
4.1 Общие положения
Кажд
ый
к
о
лич
е
ств
е
нный
м
е
тод
,
п
р
и
в
е
д
е
нный
в
п
р
ил
ож
е
ниях
A— D.
о
п
р
е
д
е
ля
е
т
к
о
н
к
р
е
т
ную
ц
е
л
е
в
ую
п
ос
л
вдоват
е
л
ь
н
ость(
и
)
Д
Н
К
’
.
Результат количественного определениядолжен явно выражать
(в
п
ро
ц
е
н
та
х
)
содержание целе
вой последовательности относительно количества специфического стандарта, соответствующих ка
либровок и контролей и быть внутри динамического диапазона применяемого аналитического метода и
а
н
а
ли
з
и
р
у
е
мо
й
п
роб
ы
.
Количественное определение’* состоит:
- из амплификации одной или большего числа специфических целевых последовательностей;
- обнаружения и подтверждения специфичности продукта(ов) ПЦР и
- определения содержания амплифицированных фрагментов (продуктов ПЦР) относительно ка
либровок.
Отбор проб — по
ГО
С
Т
Р
52173
,
ГО
С
Т
Р
52174
.
4.2 Амплификация, обнаружение и подтверждение продуктов ПЦР
Принципы амплификации, обнаружения и подтверждения последовательностей ДНК — в соотве
тствии с ИСО 21569 [1].
4.3 Количественное определение продуктов ПЦР
Принцип количественного определения состоит в определении соотношения (выраженного в про
центах) двух целевыхпоследовательностей ДНК. т. е. последовательности, представляющей интересу
ющий генетически модифицированный организм и последовательности (эндогенной), специфической
для целевого таксона.
Материалы, применяющиеся для калибровки, которые используют для количественного опреде
ления. должны быть пригодными для контроля с сертифицированными эталонными материалами
(СЭМ), если таковые имеются. Если такие материалы отсутствуют,
с
л
е
д
у
е
т
и
с
п
о
л
ьзовать
другие под
ходящие эталонные материалы*".
5 Реактивы
Все реактивы и материалы, используемые для анализа, должны быть идентичны или эквивален
тны определенным в методе. В противном случае все реактивы и материалы должны иметь квалифика
цию «для молекулярно-биологических работ» (molecular biology grade). Эти реактивы следует хранить и
использовать, как рекомендовано производителем или в соответствии с техническими требованиями
обеспечения качества лабораторных работ в
соотв
е
тств
ии
с ГО
С
Т
Р
И
С
О/
М
Э
К 17025
.
*
Ко
лич
е
ств
е
нн
о
е
о
п
р
е
д
е
л
е
ни
е
до
пу
с
к
а
е
тс
я
п
ровод
и
ть с
и
с
п
о
л
ьзова
ни
е
м
к
о
н
к
у
р
е
н
т
н
о
й
П
Ц
Р
[3],[4]
или
П
Ц
Р
в р
е
а
л
ь
н
о
й
вр
е
м
е
ни
(5],[6].
*• В случав
и
с
п
о
л
ьзова
нияП
Ц
Р
в р
е
а
л
ь
н
ом вр
е
м
е
ни
ам
пли
ф
и
к
а
ция
,
об
н
ар
у
ж
е
ни
е
и
п
одтв
е
ржд
е
ни
е
п
ро
и
с
х
о
д
я
т од
н
овр
е
м
е
нн
о
.
* "
П
р
и
м
е
р
н
о
е
р
у
к
оводство
п
р
и
в
е
д
е
н
о
в [7]. Информация об исследованиях подтверждения достоверности и
погрешности измерений собраны в международных исследованиях (8). (9]. (ГО]. (Г Г].
2