ГОСТ Р 53244— 2008
На второй стадии были проведены «слепые* анализы. Неизвестные образцы соевой муки были приготовле
ны как
ш
е
сть
пар «слепых» дубликатов, которые содержали 0 %, 0.1 %. 0,5 %. 1
%
.
5 % и 10 % (по массе) высушен
ной муки ГМ-сои линии GTS 40-3-2 в смеси с обычной соевой мукой. Образец, не содержавший сои линии
GTS 40-3-2 (0 %), был использован как «пустой» образец, чтобы отсеять неработоспособные лаборатории перед
статистическим анализом. Участники были проинструктированы экстрагировать ДНК из образцов с использовани
ем набора Qtagen. Данные, представленные лабораториями, оставшимися в испытаниях после тестов на выбросы,
были использованы для расчета среднего значения и доверительного интервала (« = 0.05). Средние значения
были определены какС/для расчета количества ГМО (%)в ходе «слепого* анализа. Среднее значение
C
f
для коли
чественного определения последовательности, специфической для конструкции GTS 40-3-2. составляло 0.95.
13 лабораторий, участвовавших во второй стадии, проанализировали 156 образцов путем амплификации
Le1 и последовательности, специфической для конструкции. Лаборатории, которые не смогли определить, что
«пустые* образцы содержат 0 % сои линии GTS 40-3-2. были расценены как неработоспособные, и все их данные
были исключены еще до тестов на выбросы. Во всех экспериментах корреляции калибровочных кривых были при
емлемыми (г >0,990). Лаборатории, показавшие экстремальные отклонения и экстремальные средние значения
данных в парах «слепых» дубликатов с разными уровнями GTS 40-3-2. были исключены из испытания как выбросы
по Кохрану (35) и по Груббсу (36). соответственно, еще перед статистическим анализом достоверности и точности. В
полученных данных не обнаружено выбросов ни по Кохрану, ни по Груббсу Рассчитанное среднее значение
сод
е
р
жа
ния
Г
М
О
.
отклонение, относительное стандартное отклонение повторяемости (%) и относительное стандартное
отклонение воспроизводимости (%) для каждого уровня ГМО в смеси приведены в таблице С.
12
.
П р и м е ч а н и е — Участники совместных испытаний не рассчитывали окончательные результаты с ис
пользованием значения
C
f
.
определенного в ходе первой стадии совместного испытания. Число копий для каждой
целевой последовательности, полученное при определении величины С/и проведении ослепых» анализов, было
передано в NFRI. и содержание ГМО (%) а «слепых* испытательных образцах было преобразовано в окончатель
ные результаты с использованием значения
C
f
.
Т а б л и ц а
С
.
12 —
Данные валидации для количественного определения последовательности, специфичес
кой для конструкции GTS 40-3-2
Доля ГМ-сои линии GTS 40-3-2 о смеси. %
Н
а
и
м
е
н
ова
ни
е
п
о
к
азат
е
ля
0.10.51510
Число участвовавших лабораторий13
1313
1313
Число неработоспособных лабораторий1
11
11
Число выбросов по Кохрану0
00
00
Число выбросов по Груббсу1
00
00
Число лабораторий, оставшихся после исключения11
1212
1212
0.61.2
5.811.7
♦
14.3+16.1
+15.1
♦
17.2
0,0680.129
0.4350.993
Среднее
з
н
а
ч
е
ни
е
содержания ГМО. %0,1
Отклонение от истинного
з
н
а
ч
е
ния
.
%
♦
8.1
Стандартное отклонение повторяемости s,“ 0.015
Предел повторяемости
г* (г
-
2.8
а
,
)
0.041
0.1910.362
1.2192.779
Относительное стандартное отклонение повторяе
мости. % в13.4
12.011.2
7.68.5
Стандартное отклонение воспроизводимости s„*0.015
0.0910.161
0.6601.246
Предел воспроизводимости Я “ (/? = 2.8 s*)0.041
0.2550.451
1.8493.489
Относительное стандартное отклонение воспроиз
водимости. % ь13.4
15.913.9
11.510.6
Ниже 20 копий1(абсолютный предел детектирова
ния этого метода)4/22
0/240/24
0/240/24
* Выражается в % ГМО.
’ Выражается как процент от среднего значения.
е Ниже 20 копий выражается как отношение числа оставшихся данных ниже 20 копий к суммарному числу
оставшихся данных.
29