ГОСТ Р 53244— 2008
Т а б л и ц е С-1— Данные валидации Збв-промотор-специфического обнаружения ГМО а 1999 г.
Н
а
и
м
е
н
ова
ни
е
п
о
к
азат
е
ля
Образцы
SA
SBSCSOSE
Число лабораторий, имевших возвратные результаты11
1111
1111
Число образцов на лабораторию1
11
11
Число исключенных лабораторий3
23
33
Число лабораторий, оставшихся после исключения8
98
88
Число принятых образцов8
98
88
Ожидаемое
з
н
а
ч
е
ни
е,
% ГМО1.4
1.83
0.71
Среднее значение. % ГМО1.70
1.893.65
0.861.58
Среднее
лин
е
йн
о
е
з
н
а
ч
е
ни
е,
% ГМО1.71
1.903.68
0,851.49
Стандартное отклонение воспроизводимости s*. % ГМО0.27
0.530.57
0.150.38
Относительное стандартное отклонение воспроизводи
мости. %16
2816
1724
Предел воспроизводимости
R
(Я * 2.8 s*)0.77
1.481,60
0.421.06
Кроме того, четырьмя участниками межлабораторных испытаний были проанализированы четыре неизвес
тных коммерчески доступных образца пищевой продукции, содержавшей от 0.3 % до 36 % (по массе; средние значе
ния) генетически модифицированной сои линии GTS 40-3-2. Метод, специфический для детектирования
конструкции GTS 40-3-2. показал относительное стандартное отклонение воспроизводимости в диапазоне от 23 %
до 36 %
[23]
.
С.1.2.3 Молекулярная специфичность
С.1.2.3.1 Общие положения
Метод был разработандля использования в качестве целевой части последовательности, описанной, напри
мер. в GenBank*. регистрационный номер АХ033493.
С. 1.2.3.2 Теоретическая специфичность
Теоретическая специфичность праймеров и зондов была оценена путем поиска а базах данных
GenBank/EMBL/DDBJ с использованием нуклеотидных последовательностей в качестве запросных последова
тельностей с помощью программы BLASTN 2.2.3 [24 апреля 2002 г.). Результат поиска подтвержден полной иден
тичностью только с ожидаемыми целевыми последовательностями.
С.1.2.3.3 Экспериментальное определение специфичности
Экспериментальная специфичность метода была оценена путем анализа ССМ IRMM-410 из высушенной со
евой муки производства IRMM, содержащей от 0 % до 5 % сои линии GTS 40-3-2 и стандартного материала фирмы
Leatnerhead Food Research Association International —
н
е
об
е
зж
и
р
е
нн
о
й
соевой муки (Lot No. 2/99-01). содержащей
О%. 0.3 %. 1,25 % и 2 % сои линии GTS 40-3-2. соответственно.
Исследованным коммерческим пищевым материалом были соевая мука, белковые изоляты сои. композит
ные пищевые продукты, содержащие соевую муку и соевый белок.
С.1.2.4 Оптимизация
Оптимизация была проведена для системы детектирования последовательностей (СДП) ABI PRISM 7700* и
набора TaqMan* химия.
Расчет праймеров и зондов был проведен с помощью программного обеспечения Primer Express* (Applied
Blosystems).
С.1.2.5 Предел детектирования (LOO)
Поскольку метод является количественным. LOD прямо не оценивался. LOD должен быть лучше или равным
пределу количественного определения, т. е. 50 геномных копий сои линии GTS 40-3-2 а 82000 геномных копиях
обычной соевой муки.
С.1.2.6 Предел количественного определения (LOQ)
Предел количественного определения был определен путем измерения серии разбавлений целевой ДНК.
как описано в
[23]
.
В соответствии с рекомендациями разработчика метода предел количественного определения
составляет 50 геномных копий сои линии GTS 40-3-2 в 82000 геномных копиях обычной соевой муки. Значение
1C
18