ГОСТ Р 53244— 2008
Т а б л и ц а С.30 — Данные валидации для количественного определения последовательности,
специфической для конструкции кукурузы Т25
Доля ГМ-кухурузы линии Т25 а смеси.
%
Н
а
и
м
е
н
ова
ни
е
п
о
к
азат
е
ля
0.10.51510
Число участвовавших лабораторий14
1414
1414
Число неработоспособных лабораторий0
00
00
Число выбросов по Кохрану2
01
10
Число выбросов по Груббсу1
00
00
Число лабораторий, оставшихся после исключения11
14
13
1414
Среднее
з
н
а
ч
е
ни
е
содержания ГМО. %0.1
0.61.2
5.610.8
Отклонение от истинного
з
н
а
ч
е
ния
+38,6
+15,3+20.0
♦
11.6+8.1
Стандартное отклонение повторяемости а“0.033
0.1620.082
0.6901.439
Предел повторяемости
г• (г
-
2.8 а,)0.092
0.4550.228
1.9324.030
Относительное стандартное отклонение повторяемос
ти. %. *23.7
28.26.8
12.413.3
Стандартное отклонение воспроизводимости0.037
0.1620.138
0.8271.591
Предел воспроизводимости
R
• (
R
-
2.8 х s„>0.103
0.4550.386
2.3174.456
Относительное стандартное отклонение воспроизводи
мости. %. ь26.5
28,211,5
14.814.7
Ниже 20 копий’ (абсолютный предел детектирования
этого метода)22/22
1/280/26
0/280/28
* Выражается в % ГМО.
ь Выражается как процент от среднего значения.
е Ниже 20 копий выражается какотношение числа оставшихся данных ниже двадцать копий к суммарному чис
лу оставшихся данных.
С.9.2.3 Молекулярная специфичность
С.9.2.3.1 Общие положения
Этот метод был приведен в
[28]
.
Информация о генетической конструкции, встроенной в геном кукурузы, дос
тупна в ссылках [28] и (41). Праймеры и зонды TaqMan® для разработки этого метода были сконструированы с по
мощью информации, описанной в
[41]
.
Если ДНК-конструкция. встроенная в Т25. была использована в других ГМ-событиях, может быть получен
ложноположительный результат, поскольку амплифицируемая последовательность происходит из этой конструк
ции.
С.9.2.3.2 Теоретическая специфичность
Теоретическая специфичность праймеров и зондов была оценена путем поиска в базах данных DDBJ (3 де
кабря 1999 г.), и документация по оценке безопасности была опубликована Министерством здоровья, труда и бла
гополучия (Япония) и Министерством сельского хозяйства, лесного хозяйства и рыболовства (Япония) с
использованием нуклеотидных последовательностей в качестве запросных последовательностей с помощью про
граммы BLASTN 2.2.3. Результат поиска подтвержден полной идентичностью только с ожидаемой целевой после
довательностью.
С.9.2.3.3 Экспериментальное определение специфичности
Амплификация с праймерами и зондами, приводящая к получению ожидаемых ПЦР-лродуктов при исследо
вании с образцами высушенной кукурузной муки, содержащей от 0 % до 10 % (по массе) ГМ-кукурузы линии Т25. ко
торые были приготовлены для этого метода NFRI
[28]
,
(29).
Испытанными образцами были зерна кукурузы, кукурузная крупа, кукурузная мука грубого и тонкого помола.
47