ГОСТ Р 70413—2022
Окончание таблицы А. 15
Компонент (аналит)РНК вируса иммунодефицита человека 1-го типа (HIV-1)
Допустимая U: менее ±0,5 1од10 от(2,66 ± 0,5)(3,18 ±0,5)(4,21 ±0,5)
среднего ЮС.
Спектр 1од10копий/мл
Копии/мл
2,16-3,16
145-1445
2,68-3,68
479-4786
3,71 -4,71
5129-51286
Пригодность для цели
Пригодна
Пригодна
Пригодна
А.11 Неопределенность измерения BCR-ABL1 с использованием одной партии материалов
для внутреннего контроля качества
BCR-ABL1 — результат аномального слияния генов, белковым продуктом которого является активированная
тирозинкиназа, вызывающая хроническую миелоидную лейкимию. Измерение уровня транскрипта РНК BCR-ABL1
во время лечения имеет медицинское значение для результата лечения пациента, а уровень BCR-ABL1 использу ют
для изменения решений о лечении.
Следующий рабочий пример оценивания MU (см. таблицу А.16) касается измерения содержания транскрип
та гибридного гена BCR-ABL1 с помощью qRT-PC по шкале международных стандартов (IS). Методика измерения
включает выделение РНК, конвертацию РНК в комплементарную ДНК (кДНК) с использованием обратной транс
крипции и количественную полимеразную цепную реакцию (qRT-PCR). РНК BCR-ABL1 выделяют из лейкоцитов
периферической крови или костного мозга. Транскрипты BCR-ABL1 быстро деградируют, и стабилизация РНК не
обходима для предотвращения деградации после отбора образца.
Содержание транскриптов BCR-ABL1 представляют в форме процентного отношения ко второму транскрип
ту, называемому контрольным геном. Контрольный ген измеряют для компенсации различий на уровне деградации
между образцами и в процессе обратной транскрипции. Образцы ЮС подвергают всем процессам, необходимым
для получения достоверного значения BCR-ABL1, за исключением лизиса эритроцитов, который не применяют, так
как использованы клетки, предварительно стабилизированные в растворе для стабилизации РНК. Тем не менее
основные источники вариабельности, связанные с определением параметров, потенциальной неоднородностью
между единичными объектами и потенциальной деградацией во время транспортирования и длительного хране
ния, суммированы для оценки относительной расширенной неопределенности %Urej(k=2) и зафиксированы путем
включения QC в каждую партию.
Т аб лица А.16 — Рабочий пример. Неопределенность BCR-ABL1 транскрипта гибридного гена
Компонент (аналит)
Транскрипты гибридного гена BCR-ABL1 (РНК)
Измеряемая величина
Процент отношения содержания транскриптов гибридного гена BCR-ABL1 к
содержанию транскрипта контрольного гена (ABL1) в периферической крови
или костном мозге
Единица измерения
Процент отношения по шкале международных стандартов (IS)
Метод измерения
Обратная транскрипция с последующей количественной ПЦР в реальном
времени кДНК с детекцией на основе флуоресценции
Методика измерения
Производитель X набора для анализа BCR-ABL1
Допустимаястандартнаянео< двукратно на значимом с медицинской точки зрения уровне 0,1 % IS, что
пределенность измерения: BCR-является основным молекулярным откликом; <5 раз — на более низких
ABL1 на основе биологическихуровнях
вариаций
Прослеживаемость калибратораАттестованные эталоны: ERM®-AD623a, ERM®-AD623b, ERM®-AD623c,
ERM®-AD623d, ERM®-AD623e, ERM®-AD623f
Неопределенность калибратора,
копий/мкл
He применяется. Калибратор содержит последовательность для обоих ге
нов для измерения исходных значений транскрипта. Неопределенность ка
либратора не может быть выражена в виде отношения и учтена при вычис
лении неопределенности измерения
СмещениеСкорректировано в IS производителем набора и прослеживается к 1-й
Международной генетической референтной группе ВОЗ для количе
ственного определения транслокации BCR-ABL с помощью ОТ-кПЦР (код
NIBSC:09/138WHO)
46