ГОСТ ISO 11133—2016
Рабочая культура целевых микроорганизмов в стационарной фазе
I
Инокуляция испытусчюо) бульона, эталонногобульонаиплотной
контрольнойсреды целевым микроорганизмом, количество клеток не более 100
______________
I
______________
Инкубирование в течение периода времени и при температуре,
установленных а соответствующем стандарте
Отбор отиеренкко количества (например. 10 мм’) от каждогобульона
(при необходимости и от разведения)и распределение поповерхности
неселентиеной среды
.
Инкубировзние е течение периода времени и при температуре,
установленных всоответствующем стандарте
Подсчет колонийвобеих средах ивычисление Яя в соответствии с 7 2 1
Рисунок 1.1 — Блок-схема для проведения эксплуатационных испытаний неселективных
жидких питательных сред с применением целевых микроорганизмов (см. J.2.1 и
J2.2)
I.3 Метод количественных испытаний селективных жидких питательных сред при помощи целевых
и нецелевых микроорганизмов
1.3.1 Методика
- Отбирают количество пробирок, каждая из которых содержит не менее 10
cat
3 среды или 10 см3 порции из
каждой испытуемой партии (см. 3.2.2}.
- Используют рабочие культуры, как это описано в 5.4.2.
- Инокуляция целевыми микроорганизмами: инокулируют испытуемый бульон, эталонный бульон и плотную
контрольную среду каждым тесг-микроорганизмом. количество клетокдолжно быть не более 100. Плотную эталон
ную среду используют для подсчета КОЕ в инокуляте.
- Инокуляция нецелевыми микроорганизмами: инокулируют испытуемый бульон, эталонный бульон и плот
ную эталонную среду каждым тест-микроорганизмом, количество клеток должно быть не менее 1000.
- Инокуляция целевым и нецелевым микроорганизмами для получения смешанной культуры: для испытаний
смешанных культур в селективной среде инокулируют испытуемый бульон, эталонный бульон и плотную контроль
ную среду целевым микроорганизмом (не более 100 клеток) и нецелевым микроорганизмом (не менее 1000 кле ток)
в одной и той же пробирке или на одной и той же чашке. При испытании смешанных культур распределение
инокулята должно проводиться по возможности на слое неселективного агара, что позволит дифференцировать
микроорганизмы смешанной культуры (например, агар с MUG для подсчета Escherichia coli или Salmonella spp.).
Когда нет возможности различить смешанные культуры на неселективном агаре, необходимо использовать среды с
селективным агаром при условии, что их эксплуатационные характеристики были предварительно проверены.
- Инкубируют среды в условиях, установленных в конкретных стандартах.
Отбирают отмеренный объем или при необходимости объем после разведения от каждого бульона и распре
деляют по поверхности слоя неингибирующего агара в случав пробирок, содержащих только целевые или только не
целевые микроорганизмы, как эго описано в 8.2.2. В случае пробирок, содержащих и целевые, и нецелевые микроор
ганизмы. инокулят распределяют по поверхности слоя той же самой селективной среды, что использовалась выше.
Для получения количества колоний в чашках, которое поддается подсчету, допускается использовать модифи
цированный метод повврхностого прикапывания Miles — Misra, спиральныйдозатор или иные системы прикапывания.
1.3.2 Подсчет колоний, вычисления и интерпретация результатов
На каждом слое подсчитывают колонии целевых и нецелевых микроорганизмов и рассчитывают выход по
сравнению с эталонным бульоном, учитывая при этом разведения, использованные для подсчета (при необходи
мости). В случае смешанных культур проводят различив разных видов.
Расчеты и интерпретация зависят от цели исследования. Интерпретация результатов зависит от цепи испыта
ния. например, в том. что касается сравнения с предыдущей партией, эталонной средой или эталонным материалом.
80