ГОСТ ISO 11133—2016
- После инкубирования исследуют каждый посев на наличие или отсутствие роста.
П р и м е ч а н и е — Для целевых микроорганизмов, как правило, достаточно использовать разведения от
10~5до 10~8. Для нецелевых микроорганизмов, как правило, достаточными являются разведения от 10 1до 10~4.
8.2.4 Вычисления и интерпретация результатов
Производительность жидкой обогатительной среды является удовлетворительной, если на
блюдается выраженный рост целевого микроорганизма (не менее 10 КОЕ из 10 мм3 материала
петли) из разведений, которые позволяют получить менее 100 КОЕ при посеве 100 мм3 на поверх
ность среды.
Для селективных жидких сред определяют коэффициент селективности sF на основе наиболь
шего разведения рабочей культуры, демонстрирующего выраженный рост (не менее 10 КОЕ) на слое
агара, и наибольшего разведения инокулированной селективной жидкой среды, демонстрирующей от
сутствие роста (или рост менее 10 КОЕ) нецелевого микроорганизма на неселективном агаровом слое.
Значение $Fдолжно быть не менее 2.
П р и м е ч а н и е — Дополнительные методы количественного испытания жидких сред применительно к
оценке разрабатываемых сред или в сравнительных исследованиях приведены в приложении I.
8.3Качественный метод эксплуатационных испытаний жидких селективных
питательных сред с использованием пробирок
8.3.1 Общие положения
В данном методе используют целевые, нецелевые либо смесь целевых и нецелевых микроорга
низмов в одной пробирке.
8.3.2 Методика
- Отбирают количество пробирок, каждая из которых содержит 10 см3среды или 10 см3порции
из каждой партии для испытаний (см. 3.1.2 и 6.3.1). Действуют в соответствии с процедурой, описанной
ниже, в соответствии с требованиями, установленными в приложениях Е и F.
- Приготовление инокулятов см. 5.4.2.3.
- Инокуляция целевым микроорганизмом: ииокулируют одну пробирку испытуемого бульона ино
кулятом. содержащим s 100 КОЕ целевого микроорганизма, и перемешивают.
- Инокуляция нецелевым микроорганизмом: инокулируют одну пробирку испытуемого бульона од
ним микроорганизмом при помощи инокулята с высокой концентрацией микроорганизма (> 1000 КОЕ) и
перемешивают.
- Инокуляция целевым и нецелевым микроорганизмами в одной пробирке, когда это требуется в
соответствии с приложениями Е и F или когда проводят оценку новой среды или нового изготовителя:
инокулируют одну пробирку испытуемого бульона целевым микроорганизмом в количестве £ 100 клеток и
большим количеством нецелевых микроорганизмов (й 1000 клеток на каждую пробирку) и перемеши
вают.
- Пробирки инкубируют в условиях, установленных в конкретных стандартах (см. 5.4.2.6).
- Отбирают петлей материал (приблизительно 10 мм3) из пробирки, содержащей целевой микро
организм. и проводят посев штрихом на слое неселективной среды (например. TSA).
- При использовании смешанной культуры целевого и нецелевых микроорганизмов отбирают пет
лей материал (приблизительно 10 мм3) и проводят посев штрихом на слое среды, специфичной для
целевого микроорганизма.
- Отбирают петлей материал (приблизительно 10 мм3) культуры нецелевого микроорганизма и
проводят посев штрихом на поверхность селективной среды (например. XLD).
- Посевы инкубируют в условиях, установленных в конкретных международных стандартах.
При использовании больших объемов среды пользователь может принять решение о пропорцио
нальном увеличении размера инокулята с тем. чтобы были получены эквивалентные результаты.
8.3.3 Вычисления и интерпретация результатов
Производительность испытуемого жидкого бульона является удовлетворительной, если наблю
дается выраженный рост (не менее 10 КОЕ или линия сплошного роста) целевого микроорганизма на
среде, специфичной для данного микроорганизма.
Селективность испытуемого жидкого бульона является удовлетворительной, если наблюдается
отсутствие роста (или менее 10 КОЕ) нецелевых микроорганизмов на поверхности неселективной ага
ровой среды.
23