ГОСТР ИСО 20857—2016
Приложение Е
(справочное)
Разработка процесса
Е.1 Разработка процесса — Биологические методы
Ниже приведены три метода, которые применяют для определения летальности процесса. Метод полной
гибели имеет наибольший запас по границе инактивации микроорганизмов и является самым простым в исполь
зовании.
Метод полной гибели: основан на применении резистентного 6И с известной популяцией, демонстрирующей
определенное логарифмическое сокращение спор — SLR. Методы полной гибели обычно применялись для уста
новки циклов стерилизации горячим воздухом впромышленности. Данный метод основывается на предположении,
что в процессе стерилизации инактивируется высокая микробиологическая нагрузка (например, между 103 и 106).
которая, возможно, не имеет отношения к бионагрузке перед стерилизацией. Данный метод называется методом
полной гибели, так как условия цикла, установленные с целью «убить» микробиологическую нагрузку, с дополни
тельным запасом прочности, должны быть намного более строгими, чем условия, необходимые для инактивации
бионагрузки на продукте.
Величина D микробиологической нагрузки и микроорганизмов бионагрузки на продукте может различаться в
различных средах и различных местах расположения. Таким образом, изначальное количество или концентрация
нагрузки выбирается на основе резистентности популяции спор при заданных условиях использования.
При применении метода полной гибели необходимо учитывать потенциальное снижение температуры изде
лия и его упаковки или контейнера. Увеличенная химическая и физическая деградация, усиленное образование
частиц и ограничение срока годности продукта могут быть результатом чрезмерной выдержки при высоких
температурах.
Производитель должен получать данные о типичных бионагруэках, нанесенных на изделие. Эти данные не
должны бытьстоль же исчерпывающимиинедолжны получаться также часто,какпри разработкеданного метода.
Комбинированный метод биологического индикатора/бионагруэки: комбинированный метод БИ/бионагрузки
основан на применении резистентного БИ или УКП с популяцией, равной или большей, чем популяция натуральной
бионагрузки на изделии.Данный метод приемлем, когда имеютсядостаточные данные о бионагрузке, полученные в
результате программы мониторинга бионагрузки, чтобы доказать, что может применяться БИ или УКП с популя цией
менее 106.
При комбинированном подходе БИ/бионагрузки, микробиологическая стерилизационная нагрузка продукта
может потребовать инактивации изначальной концентрации инокулированногоматериала до установленноголога
рифмического уровня. Относительная резистентность и популяция инокулированного материала первичной
нагрузки микроорганизма микробиологической нагрузкидолжна сравниваться со средним количеством итепловой
резистентностью бионагрузки, нанесенной на продукт. Такое сравнение показывает, что инактивация предопреде
ленного уровня микробиологической нагрузки гарантирует достижение желаемой вероятности выживших микро
организмов на бионагрузке. Считается, что данный метод основан на бионагруэке, следовательно, бионагрузка
просчитывается и резистентность опредепяется. как в методе абсолютной бионагрузки.
Метод абсолютной бионагрузки: образцы изделий, которые показывают наиболее высокие уровни био-
нагрузки и организмы с наибольшей резистентностью, подвергаются возрастающим периодам выдержки. После
выдержки проводят испытание на стерильность в соответствии с требованиями ИСО 11737-2.
Метод абсолютной бионагрузки включает проверку изделия на теплоустойчивые микроорганизмы — напри
мер. с использованием изолята бионагруэки (полученного вцелях создания трудности для стерилизации изделия),
представляющего собой наиболее резистентную популяцию бионагрузки. Изолят бинагрузки может быть
размно жен. инокулирован на или внутрь продукта и использован при исследовании трудностей для
стерилизации продук ции с целью доказательства желаемой вероятности выживших микроорганизмов в
бионагрузке изделия. Обычное количество бионагрузки, используемое врасчетах,основано на среднем
количествебионагрузки плюс трехкратное стандартное отклонение.
Резистентность бионагрузки можно определить с помощью выдержки образцов продукции, содержащих био
нагрузку. в увеличенных временных интервалах выдержки при предлагаемых условиях цикла, а затем провести
испытания на стерильность с целью определения количества выживших организмов или доли положительных
результатов, присутствующих при различной продолжительности выдержки (Halvorson и Ziegler. Pflug и Holcomb).
Бионагрузка на продукт, как правило, состоит из смешанных организмов, обычно имеющих разные величи
ны О. В данном случае логарифмическое сокращение каждого организма после одинакового времени выдержки
будет различаться. Таким образом, общее логарифмическое сокращение после каждого интервала выдержки
также не будет одинаковым и график не будет линейным. Прямая линия от изначального количества до любой
единичной точки после выдержки будет или недооценивать, или переоценивать конечную точку и УОС.
41