Приложение D
(обязательное)
ГОСТ ISO 7218—2015
Подсчет колоний в случае двух чашек и одного разведения
D.1 Введение
Настоящее приложение устанавливает методы расчета и выражения результатов для подсчета с исполь
зованием на одно разведение.
Применяют все требования и рекомендации, установленные в 10.3.
В настоящем приложении представлены только отличающиеся разделы и те разделы, которые необходи
мы для понимания.
D.2 Подсчет колоний
Применяют требования и рекомендации, установленные в 10.3.1 и 10.3.2.1.1.
В соответствии с периодом термостатирования. установленном в конкретном стандарте, подсчитывают
колонии (общие колонии, типичные колонии или предполагаемые подозрительные колонии) в каждой чашке, со
держащей до 300 колоний включительно (или любое другое число, установленное в конкретном стандарте).
В данном подразделе рассматриваемые случаи соответствуют следующим общим случаям:
- посев на одной чашке Петри диаметром 90 мм для разведения: проводят как минимум два последова
тельных разведения:
- максимальное подсчитываемое число общих присутствующих колоний: 300 на чашку:
- максимальное общее число колоний (типичных и нетипичных), присутствующих в чашке в момент под
счета типичных и предполагаемых колоний: предпочтительно 300 на чашку:
- максимальное подсчитываемое число типичных или предполагаемых колоний: 150 на чашку:
- число предполагаемых колоний, инокулированных для идентификации или подтверждения (см. D.4) в
каждой отобранной чашке: как правило, пять.
Эти цифры должны быть установлены в конкретных стандартах.
Ниже установленные методы подсчета предназначены для тех случаев, которые встречаются чаще всего
в период проведения испытаний в соответствии с надлежащей лабораторной практикой. Иногда могут иметь ме
сто особые случаи (например, количество колоний в двух чашках Петри с одним и тем разведением могут
де монстрировать существенное расхождение или отношение коэффициентов разбавления, используемых для
двух последовательных разведений, может существенно различаться) и поэтому необходимо, чтобы при
подсчете результатов опытный микробиолог провел исследование и интерпретацию и. при необходимости,
забраковал их.
D.3 Метод расчета: общий случай (подсчет общего числа колоний или типичных колоний)
В целях достижения достоверного результата, как правило, является необходимым проводить подсчет ко
лоний. по меньшей мере, на одной чашке, содержащей минимум 10 колоний [общих колоний, типичных колоний
или колоний, соответствующих критериям идентификации или подтверждения (см. D.4)].
Если используют две чашки Петри на одно разведение, соотношение числа колоний, подсчитанных на
первой чашке, и колоний, подсчитанных на второй чашке, должно быть равно 1.
Рекомендуется, чтобы для колоний, подсчитываемых на второй чашке, были установлены пределы в ла
боратории.
Данные пределы могут являться пределами, установленными в[42].
В случав, когда данные пределы не соблюдаются, результат следует интерпретировать с осторожностью.
Пример 1 — Если подсчет колоний на переой чашке дал максимальное значение 250. то подсчет
колоний на второй чашке должен дать минимальное значение 196 (см. [42]).
Рекомендации, касающиеся соотношения подсчетов колоний разведений
d
, и
d,
применимы (см 10.3.2.2).
Рассчитывают число
N
микроорганизмов, присутствующих в анализируемой пробе как средневзвешенное
двух последовательных разведений, по формуле D.1:
N =
1C
V’ fnj.H- (0,1 л*)]
d
(D.1)
где
1C
— сумма колоний, подсчитанных на всех чашках, отобранных для двух последовательных разведений,
при условии, что. по меньшей мере, одна чашка содержит минимум 10 колоний;
V
— объем инокулята, использованного в каждой чашке, см3:
л, — число чашек, отобранных для первого разведения;
nt
— число чашек, отобранных для второго разведения;
d
— коэффициент разбавления, соответствующий первому отобранному разведению [с/= 1. если
используют неразбавленный жидкий продукт (анализируемую пробу)].
Результат вычисления округляют до двух значащих цифр. Если третья цифра меньше пяти, предшеству
ющую цифру не изменяют, если третья цифра больше или равна пяти, увеличивают предшествующую цифру на
единицу.
61