ГОСТ ISO 7218—2015
10.3.2.5.3Если чашка с последним засеянным разведением содержит от 10 до 300 колоний (или
любое другое количество, установленное в конкретном стандарте) — общее количество колоний,
количество типичных колоний или количество презумптивных колоний — число N’ присутствующих
микроорганизмов вычисляют по формуле
с
N ’=
V H ’
(4)
где с — число колоний, подсчитанных в чашке;
V — объем посевного материала, использованный для каждой чашки, в кубических
сантиметрах;
d — выбранное разведение (коэффициент разбавления).
Результат округляют в соответствии с 10.3.2.2.
За результат принимают число N’ микроорганизмов на кубический сантиметр (для жидких про
дуктов) или на грамм (для прочих продуктов).
Пример — Подсчет дал следующие результаты:
- в последнем засеянном разведении (Ш 4) 120 колоний.
Таким образом.
Лг ~ 1:°- 1200000 •
NO
’ 4
Округление результата проводят в соответствии с 10.3.2.2. число N микроорганизмов равно
1 200 000
или
1.2
х
ю в
на кубический сантиметр или на г.
10.3.2.6 Измерение неопределенности
См. ISO 19036 в отношении количественных определений.
10.4 Подсчет колоний дрожжей и плесеней
10.4.1 Общие положения
Подсчет колоний дрожжей и плесеней обычно проводят либо методом разливки сред, который
позволяет облегчить задачу, либо методом подсчета при поверхностном посеве, который
обеспечивает максимальное воздействие на клетки со стороны атмосферного кислорода и позволяет
избежать теплового воздействия от расплавленного агара. Предварительно разлитый по чашкам агар
перед посевом рекомендуется подсушить (см. ISO 11133).
Некоторые дрожжи и плесени могут вызывать инфекционные заболевания или аллергические
реакции даже у здоровых людей. В связи с этим необходимо проявлять особую осторожность при
работе с ними. Оптимальным вариантом является хранение чашек в термостате, а не в открытом
помещении. Крышки с чашек рекомендуется снимать только в случае крайней необходимости,
обычно только при приготовлении предметных стекол для исследования под микроскопом. Перед
переносом материала прокаленные иглы необходимо остудить, чтобы избежать рассеивания конидий и
других клеток. Рабочие столы и термостаты следует регулярно дезинфицировать.
Чашки Петри следует инкубировать в перевернутом положении и не трогать, пока на чашках не
вырастет посевной материал для подсчета колоний. Это связано с тем. что перемещение чашек
может приводить к освобождению конидий или спор плесени и последующему появлению колоний-
спутников. приводя к повышенному подсчету популяции дрожжей и плесени.
10.4.2 Подсчет колоний дрожжей и плесеней
Для подсчета берут чашки, содержащие от 10 до 150 колоний. Если флора микроорганизмов
состоит преимущественно из плесеней, выбирают чашки, в которых количество колоний ближе к ниж
ней границе интервала; если флора микроорганизмов состоит преимущественно из дрожжей, для
подсчета выбирают чашки, в которых количество колоний ближе к верхней границе интервала.
Если идентичность колоний вызывает сомнения, исследуют живые препараты или окрашенные
препараты клеток, не менее пяти колоний на образец, чтобы подтвердить, что бактерии отсутствуют.
10.5 Подсчет при использовании жидких сред
10.5.1 Принцип
Пробы для анализа высевают в жидкую среду, предназначенную для поддержки роста конкрет
ного микроорганизма или группы микроорганизмов и часто для подавления размножения прочих мик
роорганизмов.
38