ГОСТ ISO 7218—2015
Изготовитель должен также определить контрольные штаммы, которые лаборатория может ис
пользовать для проверки сохранности характеристик биохимических наборов.
12.6 Серологические методы
12.6.1 Общие положения
Если необходима серологическая идентификация, ее выполняют после биохимической иден
тификации изолированных колоний.
12.6.2 Реакция агглютинации на предметном стекле
Реакция антиген-антитело вызывает слипание бактериальных клеток и образование рыхлых
масс или плотных гранул. В случае бактерий семейства Enterobacteriaceae реакция между «Н» (т. е.
флагеллярным) антигеном и гомологичной антисывороткой дает рыхлое слипание, тогда как
реакция с участием «О» (т. е. соматического) антигена дает более плотное слипание в гранулы.
Перед реакцией агглютинации с антисыворотками рекомендуется выполнить тест, чтобы опре
делить. агглютинируют ли бактериальные клетки в растворе хлорида натрия [3 % (по массе)). Если
бактериальные клетки агглютинируют, штамм является склонным к аутоагглютинации и его не следу ет
использовать в реакции агглютинации.
Имеющиеся в продаже готовые антисыворотки бывают двух типов:
- поливалентная антисыворотка, которая реагирует с микроорганизмами конкретного вида или с
группами сероваров (серотипов бактериальной клетки) и которая пригодна для предварительной
идентификации.
- специфичные моноклональные антитела, применение которых позволит идентифицировать
конкретный серовар.
Лаборатория должна получить сертификат контроля качества на каждую партию антисыворот
ки с указанием контрольных штаммов.
Проверяют, чтобы реакция агглютинации на предметном стекле удовлетворяла требованиям
данной задачи, как показывают оценочные исследования, опубликованные в международной научной
литературе, преимущественно касающейся микробиологии пищевых продуктов1’.
При использовании реактивов рекомендуется использовать положительный и отрицательный
контроль, удовлетворяющий условиям реакции.
12.6.3 Реакция латекс-агглютинации
Более быстрый метод можно выполнить с имеющимися в продаже наборами, с применением
частиц латекса, покрытых специфичными для группы бактерий антителами (например, для информа
ции. касающейся Escherichia coli 0157, см. [43]; касающейся Staphylococcus aureus, см. [38]). Антиген в
экстракте испытывают против ряда латексных реактивов.
Проверяют, чтобы агглютинация на латексе удовлетворяла требованиям данного исследова
ния. что подтверждено в оценочных исследованиях, описанных в международной научной литерату
ре и преимущественно связанных с микробиологией пищевых продуктов.
Лаборатория должна получить сертификат контроля качества на каждую партию с указанием
штаммов.
При использовании реактивов следует использовать положительный и отрицательный
контроли. удовлетворяющие условиям реакции.
13 Протокол испытаний
В протоколе испытаний должен быть указан использованный метод, температура инкубации в
термостате, если необходимо, и полученные результаты. Также необходимо упомянуть все детали
испытания, не установленные в настоящем стандарте, а также считающиеся необязательными,
наряду с подробностями всех происшествий, которые могли повлиять на результаты.
В протоколе испытаний также необходимо указать, нужно ли проводить дальнейшие испытания
в другой лаборатории для сравнения, и. если такие испытания были выполнены, каковы их результа
ты.
В протокол испытаний необходимо включать всю информацию, необходимую для полной
идентификации образца. Допускается включать информацию, необходимую для трактовки
результатов испытания.
Если необходимо, в протокол испытаний следует включать измерение неопределенности в со
ответствии с ISO 19036.
** Запросы об информации следует направлять в национальные, региональные или международные спра
вочные центры, указанныедля каждого микроорганизма.
47