ГОСТ ISO 7218—2015
мость измерения уменьшилась вдвое. Если используют способы только с небольшим числом дубли
руемых пробирок, неопределенность измерения высокая.
В зависимости от размера образец для анализа можно засовать в пробирки или флаконы, со
держащие требуемое количество жидкой среды. Для образцов небольшого объема можно использо
вать также многолуночные планшеты.
10.5.3.1 Способ одного разведения
Если ожидаемая концентрация микроорганизмов невелика или ожидается ее умеренное изме
нение. наиболее подходящим способом посева будет одна серия равных проб для анализа. Там. где
ожидаемое соотношение между максимальным и минимальным количеством микроорганизмов менее
25. десять параллельных проб для анализа является наименьшим числом для получения необходи
мых результатов: для 50 параллельных пробирок соотношение 200 является предельным. В случае,
когда фактическая концентрация достигает максимального значения НВЧ. вероятность того, что во
всех пробирках будет наблюдаться рост или отсутствие роста, будет слишком высокой. Примеры
НВЧ для одного разведения приведены в таблицах С.1 — С.4.
10.5.3.2 Способ нескольких разведений
Если концентрация микроорганизмов в пробе неизвестна или предполагается ее значительное
изменение, может потребоваться посев на серии пробирок из нескольких разведений. Высевают до
статочное число разведений, чтобы обеспечить исследование как с положительными, так и с отрица
тельными результатами. Число разведений также зависит от метода вычисления, используемого для
оценки значения НВЧ. Если требуется применение таблиц, то используют конфигурации способов,
представленные в таблицах. При использовании компьютерных программ число разведений и парал
лельных пробирок не ограничивается, что очень важно с точки зрения использования новых коммер
ческих тест-наборов для НВЧ.
10.5.3.3 Симметричный способ посева
В наиболее часто применяемом симметричном способе посева для определения НВЧ исполь
зуют три или пять параллельных пробирок на разведение. Точность, получаемая при применении
этого способа, резко уменьшается по мере уменьшения числа пробирок на разведение. Результаты с
использованием трех пробирок являются не более чем показателями порядка значения концентра
ции. Если требуется более высокая точность, рекомендуется использовать пять или больше парал
лельных пробирок. Примеры определения НВЧ с использованием трех, пяти и десяти пробирок при
ведены соответственно в таблицах С.5, С.б и С.7.
10.5.3.4 Асимметричный способ
В асимметричных способах используют разное количество пробирок в разных разведениях.
Применение таких способов пригодно только для оценки количества микроорганизмов в четко задан
ном диапазоне, (см. примеры в ISO 8199).
В случае неосторожности пробирка может быть утеряна или разбита, что приведет к необходи
мости использовать асимметричный способ. Однако некоторые коммерческие тест-наборы предна
значены для асимметричных способов. Для оценки данных, полученных на основе асимметричных
способов, рекомендуется использовать надлежащее программное обеспечение (см. 10.5.6.3).
10.5.4 Термостатирование
Засеянные пробирки, колбы и флаконы инкубируют в термостате или в водяной бане. Многолу
ночные планшеты помещают в термостат.
Выбирают продолжительность и температуру инкубации, получив информацию в соответству
ющем стандарте на конкретный метод испытания, поскольку эти параметры зависят от типа рассмат
риваемого микроорганизма или группы микроорганизмов.
Для некоторых микроорганизмов может потребоваться термостатирование в два этапа или этап
подтверждения. Для получения дополнительной информации см. соответствующие стандарты, но
следует иметь в виду, что в этом случае возникают дополнительные трудности с расчетом величины
НВЧ (см. ссылку [52]).
10.5.5 Интерпретация результатов
Критерии дифференциации положительных и отрицательных результатов различны для каждо
го типа микроорганизма или группы микроорганизмов и определяются в соответствующих стандартах.
Используя эти критерии, подсчитывают и записывают число положительных результатов, получен
ных во всех образцах для анализа, взятых из одной лабораторной пробы.
10.5.6 Определение значений НВЧ
Существует три различных способа определения значения НВЧ: вычисление по математиче
ским формулам, сопоставление с таблицами НВЧ или применение специальных компьютерных про
грамм. При условии, что эти методы основаны на одних и тех же статистических допущениях, все эти
варианты в равной степени достоверны. Эти три метода описаны ниже.
10.5.6.1 Математический метод
40