ГОСТ ISO 10993-4-2011
нормализованного на общее количество гемоглобина в пробе (за 100 % принимают
концентрацию гемоглобина, выделяющегося в пробу при полном разрушении всех
присутствующих в ней эритроцитов). В случае тестирования медицинских изделий,
для которых применение высоко разбавленных суспензий эритроцитов невозможно,
гематокрит крови и другие факторы должны быть учтены при нормализации индекса
гемолиза [63].
Каждая лаборатория, по меньшей мере, должна иметь возможность измерять
общую концентрацию гемоглобинав крови и содержание его в плазме.
Концентрация свободного гемоглобина плазмы (в норме от 0 до 10 мг/л)
существенно ниже его общей концентрации в крови (в норме от 11000 до 18000
мг/л). Следовательно, для их определения в процессе тестирования должны быть
задействованы разные методы.
Три аналитических метода получили наибольшее распространение при
определении концентрации общего гемоглобина крови НЬ [70].
П р и м е ч а н и е— Исследователь должен учитывать, что ряд факторов может
вносить искажения в результаты тестирования гемолитической активности. Химические
агенты некоторых видов, содержащиеся в медицинских материалах и растворах, способны
воздействовать на осмотическую стойкость эритроцитов (например, фиксирующие агенты,
такие как формальдегид или глутаровый альдегид), провоцировать осаждение эритроцитов
(например, ионы меди или цинка), изменять спектры поглощения гемоглобина (например,
полиэтиленгликоль или этанол) [64]. [65].
С.6.1.2 Определение концентрации общего гемоглобина крови
С.6.1.2.1 Гемоглобинцианидный метод
Первыйиз классическихметодов определенияконцентрацииобщего
гемоглобина крови - гемоглобинцианидный - был опубликован Международным
КомитетомпоСтандартизациивГематологии(InternationalCommitteefor
Standardization in Haematology) [71]. Гемоглобинцианидный анализ удобен тем, что
легко может быть автоматизирован и для него доступны прямые стандарты (HiCN).
Метод основанна окислениигемоглобинаспоследующимобразованием
циангемоглобина, имеющего максимум поглощения при 540 нм. Детергент,
используемый в качестве лизирующего агента, помимо высвобождения гемоглобина
из эритроцитов снижает мутность раствора (источник помех и ошибок при
фотометрировании на 540 нм) за счет преципитации белков. При использовании
данного метода спектральные помехи со стороны плазмы минимальны, что
41