ГОСТ ISO 10993-4-2011
При рассмотрении результатов, полученных в тестах in vitro, учитывают
следующие показатели гематокрит, антикоагулянты, условия хранения пробы, срок
хранения пробы, наличие контакта с воздухом и уровень pH, температуру,
последовательностьпроведенияисследованийизучаемогоматериалаи
экспериментального контрольного образца, соотношение площади поверхности и
объема, условия динамики жидкости (особенно скорость кровотока либо скорость
вымывания стенки). Исследования следует проводить, по возможности, в пределах
не более 4 ч, так как многие свойства крови изменяются сразу же после отбора
образца.
6.3.2 Методы ex vivo
Методы ex vivo предназначены для изделий, которые предполагают
использовать ex vivo, например изделия, присоединяемые извне. Исследования ех
vivo также пригодны для изделий, эксплуатировать которые предполагается in vivo,
например, сосудистые протезы. Однако в таком случае, исследование ex vivo не
заменяет имплантацию в качестве теста.
Существуют готовые тест-системы для мониторинга адгезии тромбоцитов,
возникновенияэмболии,осажденияфибриногена,массы тромбов,адгезии
лейкоцитов, убыли тромбоцитов в крови и активации тромбоцитов [20], [30], [48].
Скорость кровотока измеряют либо прибором с эффектом Доплера, либо
электромагнитнымметодом.Изменение скорости кровотокаможет служить
индикатором возникновения тромбов, их размеров, мест отложения, а также
развивающейся эмболии. Для мониторинга взаимодействия изделий с кровью ех
vivo используют компоненты крови с радиоактивными метками. Чаще всего метят
тромбоциты и фибриноген. Изменение реактивности тромбоцитов при нанесении
метки будет минимизировано при более тщательном соблюдении всех деталей этой
процедуры [23], [24], [25].
Преимущества тестов ex vivo по сравнению с тестами in vitro заключаются в
том, что при исследованиях ex vivo используют поток нативной крови, что исключает
артефакты, вызванные антикоагулянтами, и создает физиологические условия
кровотока. Ex vivo можно исследовать несколько материалов, так как появляется
возможность менять камеры, а также наблюдать отдельные события в реальном
времени. Среди недостатков исследований ex vivo - различие скорости кровотока в
разных экспериментах, у разных животных, и, как правило, относительно короткие
периоды времени для оценки. В связи с этим рекомендуется использовать одно и то
же животное для положительного и отрицательного контрольных образцов.
17