ГОСТ ISO 16140—2011
Например.
LOD
= среднее значение (холостое) ♦ zs0 (холостое), где
z
= 2 • 1,645 к 3.3 есть гаус
совское критическое значение при
а =
р = 0.05 (односторонний доверительный интервал, см. 6.2.2.4)
для достаточно большого числа
п
холостых образцов.
6.2.2.2.3 продел количественного определения
(LOQ)
(quantification limit): Наименьшее коли
чество аналита (т. е. наименьшее реальное число организмов), которое можно измерить и количествен
но оценить с заданной прецизионностью и точностью в экспериментальных условиях метода, подлежа
щего валидации.
Примечание — Ассоциация химиков-аналитиков. состоящих на государственной службе. (АОАС),
определяет предел количественного определения для количественных методов как
LOQ
= 10sQ. Это равноценно
утверждению, что коэффициент изменчивости
CVf
=
sjx
должен быть ниже 10 % . см. [2).
6.2.2.3 Протокол измерений и образцы
Для оценки базового или порогового разброса
sQ
проводят по меньшей мере шесть (лучше 10)
определений холостых образцов (отрицательных, с нулевой дозой или дозой, близкой к нулю).
Примечание — При подсчете числа организмов достаточно более пяти образцов на минимальном, не
равном нулю, уровне, для того, чтобы удостовериться, что степень контаминации составляет р < 50 %. когда не
обнаруживается положительныхобразцов (доверительный уровень 95 %). Если обнаруживается один положитель
ный образец из пяти, то можно считать, что р > 1 %. Таким образом, если начать с трех доз аналита стандартного
материала, выбранных из 3. 10. 30. 100. 300 и т.д. КОЕ/единица. и реплицируя каждый из них минимум шесть раз,
можно оценить критический уровень (50 %-ное обнаружение): например, видеальном случав может быть следую
щее: 0)6 при 10. 2/6 при 30. б’б при 100. что дает оценку, близкую к 30 КОЕ /единица. Тем не менее, оценку, кото рую
дает эта процедура, можно использовать (Данные о когерентном оценивании см. в приложении Р).
q
6.2.2.4 Вычисления
В общем случае критический уровень и предел обнаружения включают статистические ошибки
двух типов:
а
(соответствует определению несуществующей разницы (ложноположительный результат)
и р (соответствует необнаружению истинной разницы (ложноотрицательный результат)). Показатель 1
- р является вероятностью достоверного определения значения, превышающего критический уро вень
(LC).
Из результатов определений X , на холостом образце оценивают их среднеквадратическое откло
нение s0 (по Sp, приложение R) и систематическую погрешность х0
=
медиане х0(, что свидетельствует об
общей недостаточной специфичности, которая является статистически значимой, если
t
=
(*0
)/вр
> ta >
1-645 (см. ниже).
Критический уровень
LC
~ 1.65s0 (+х0 для альтернативного метода) для а = 5 % (и 1 - р = 50 %).
(Точнее.
LC
=
tas
0, где
ta
является значением коэффициента Стьюдента для одностороннего уров
ня а и
п
- 1 степени свободы, для а = 5 % и
п
= 6
ta
= 2.015. и при этом
Lc *
2.0 s0: если
п -* *>.
то
<«-» 1.645).
Предел обнаружения равен
LOD *
3.3sg (+
х
0
д
л
я
альтернативного метода) для а = 5 % и
1 - р = 95 %.
(Точнее.
LD
= (Г_ +
t^)s0,
где Г|( является значением коэффициента Стьюдента для одностороннего
уровня р и
п -
1 степени свободы, например, для 1 - р=90 % и
п =
6 L = 1.476. и при этом
LD
’ З.б^; для 1
- р = 80 %. tp = 0.920).
Предел количественного определения
LOQ -■
10 s0 (♦ х0 для альтернативного метода).
6.2.3 Относительная чувствительность и определение неизвестных образцов
6.2.3.1 Общие требования
Оценку чувствительности применяют для того, чтобы убедиться, что значения, получаемые аль
тернативным методом, заметно не отличаются от таковых для стандартного метода (разница менее 30
%).
6.2.3.2 Определение
6.2.3.2.1 относительная чувствительность метода (SE) (relative sensitivity): Способность аль
тернативного метода обнаруживать два разных количества аналита. измеренных референтным ме
тодом в заданной матрице с заданным средним значением или по всему диапазону измерения; т. е. это
— минимальное изменение количества (увеличение концентрации х аналита). которое приводит к
значимому изменению измеряемого сигнала (результат у).
Примечание — Относительная чувствительность отличается от предела обнаружения (6.2.2). так как ее
вычисляют для каждого значения в диапазоне измерений. Она связана со статистическими ошибками двух типов
ы(двухсторонний доверительный интервал) и
Ь.
16