ГОСТ РИСО 16140—2008
5.1.2 Относительный уровень обнаружения
5.1.2.1 Определение
В рамках настоящего стандарта под относительным уровнем обнаружения понимают наименьшее
число культивируемых микроорганизмов (3.4), которое может быть обнаружено в образце в 50 % случаев
альтернативным и стандартным методами.
5.1.2.2 Протокол измерений
Испытание проводят следующим образом.
- используют один пищевой продукт из каждой пищевой категории, выбранной по 5.1.1.2.1, с учетом
области применения валидации (см. приложение В);
- используют пять разных целевых микроорганизмов (или меньше, с учетом области применения
валидации), каждый из которых предназначен для одной пищевой категории, если это возможно (опреде
ление целевых микроорганизмов приведено в приложении G);
- предпочтительно проводят испытания для пяти уровней (но минимум для трех уровней) по одному
целевому микроорганизму на каждый пищевой продукт, включая отрицательный контрольный образец и т.д.
Первым уровнем должен служить отрицательный контрольный образец. Вторым уровнем должен быть тео
ретический уровень обнаружения. Третий уровень— немного выше теоретического порога обнаружения, и
все последующие уровни должны быть выше предыдущего. Можно использовать последовательные
верхние уровни с концентрациями, разнящимися множителем, приблизительно равным 3;
- воспроизводят кахщую комбинацию (пищевой продукт, уровень контаминации) шесть раз для испы
тания и альтернативным, и стандартным методами. Проводят разделение науровне, где методы отличают
ся. как показано в приложении D. Таким образом, если этап 1обоих методов одинаков (например, тот же
предварительно обогащенный бульон), проводят разделение на этапе 2 (см. приложение D, случай 1).
Если первый этап неодинаков, то есть культуральная среда, методология или степень разведения различа
ются. то смешивают удвоенную массу образца с равным по массе или объему количеством стерильной
воды или другого подходящего разбавителя, а потом разделяют надва подобразца;
- используют полную процедуруальтернативного и стандартного методов, включая подготовкуобраз
ца. Засев каждого пищевого образца можно проводить до или после добавления культуральной среды.
Если нужно, то для обеспечения лучшей прецизионности на самом нижнем уровне посевного мате
риала увеличивают массу пищевого образца или число реплик образцов. Например, можно использовать 75
г пищевого образца, контаминированного тремя клетками, вместо 25 г образца, контаминированного
одной клеткой.
Чем больше число использованных уровней засева, тем точнее определение порога обнаружения.
5.1.2.3 Вычисления
Для каждого уровня L, (/’ = от 0 до 3) и каждой комбинации пищевой продукт/штамм ( / = от 1 до 5)
сравнивают оба метода, как указано в таблице 3;
Т а б л и ц а 3 — Вычисление относительного уровня обнаружения
Метод
Результаты
Отрицательные (-)
Положительные <♦)Всего
Стандартный
а
п -аЛ= 6
Альтернативный
Ь
п -ЬЛ= 6
Всего
а + Ь
2
л - (а + 6)
2л= 12
Для таблиц малого размера 2 x 2 использовать точные критерии Фишера.
5.1.2.4 Сравнения
Чтобы не проводить сравнение обоих методов на каждом уровне и для каждого продукта и штамма,
можно использовать одно и то же испытание при сравнении двух продуктов/штаммов на одном и том же
уровне.
Если естьоснования считать, что продукт и штаммы сравнимы, то такое же испытание можно прове
сти при п > 6 с объединением продукта/штаммов для каждого уровня Ц.
Уровни тоже можно объединять для проверок, но используя при этом ранжирование;/^ + Z.,,
L0+ L, + L2, L, ♦ /-2, La+ L, + L2+ L3, L, + L2+ L3. L2+ L3. как с объединением продукта/штаммов, так и без
объединения.
7