ГОСТ Р ИСО 11737-1—2022
щие компоненты и их концентрации, осмотическое давление и pH). При наиболее благоприятном варианте состав
должен быть таким, чтобы не происходило пролиферации или инактивации микроорганизмов, однако это может
оказаться невозможным установить для всех потенциальных контаминантов.
В.2.3.3 При использовании жидкости для извлечения микроорганизмов с твердых поверхностей можно до
бавить мягкое поверхностно-активное вещество (см. таблицу В.1).
В.2.3.4 Обычно используемые элюенты и разбавители включают элюенты, приведенные в таблице В.1.
Т аб лица В.1 — Примеры элюентов и разбавителей
Раствор
Концентрация в воде
Применение
Буферизованный
хлорида натрия-пептона
раствор0,067 М фосфат,
0,43 % хлорид натрия,
0,1 % пептон
Общие положения
Калгон Рингера
1/4 прочности
Растворение альгинатных тампонов кальция
Пептонная вода
От 0,1 % до 1,0 %
Общие положения
Фосфатно-солевой буфер
0,02 М фосфата,
0,9 % хлорид натрия
Общие положения
Раствор Рингера
1/4 прочности
Общие положения
Хлорид натрия
От 0,25 % до 0,9 %
Общие положения
Тиосульфат Рингера
1/4 прочности
Нейтрализация остаточного хлора
Вода
N/A
Разбавление водных проб. Приготовление изотони
ческих растворов растворимых веществ перед под
счетом
П р и м е ч а н и е — Данный перечень не является исчерпывающим. Поверхностно-активное вещество, такое как
полисорбат 80, может быть добавлено к элюентам и разбавителям. Обычно используют концентрацию от 0,1 %
до 1,0 %, в зависимости от конкретного применения. Выбор подходящей концентрации в конкретной ситу ации
должен быть тщательным, поскольку может произойти вспенивание.
В.З Методы, при которых извлечение микроорганизмов элюированием не используют
В.3.1 Контактное покрытие
В.3.1.1 Контактные пластины или предметные стекла — это средства, с помощью которых затвердевшая
питательная среда может прижиматься к поверхности для того, чтобы жизнеспособные микроорганизмы прилип ли
к поверхности среды. Затем пластину или предметное стекло можно инкубировать для подсчета полученных
колоний.
В.3.1.2 Преимущество таких систем в том, что они просты в использовании. Результаты непосредственно
связаны с областью контакта с затвердевшей питательной средой.
В.3.1.3 Потенциальными недостатками являются естественное скопление клеток на поверхности, распро
странение колоний на границе агара, высыхание агара и возможность анаэробного расположения.
В.3.1.4 Этот метод следует использовать только тогда, когда другие методы неприменимы, поскольку эф
фективность, как правило, низкая. Контактные пластины и предметные стекла обычно используют только на пло
ских или по крайней мере стандартных поверхностях.
В.3.2 Покрытие агаром
В.3.2.1 Покрытие агаром включает покрытие поверхности продукта расплавленной агаровой средой и позво
ляет ему затвердеть с последующей инкубацией для получения видимых колоний. Этот метод обычно не исполь
зуется, но может быть применим, когда биологическая нагрузка низкая и когда подходит конфигурация продукта.
В.3.2.2 Потенциальными недостатками являются естественное скопление клеток на поверхности, распро
странение колоний на границе агара, высыхание агара и возможность наличия анаэробов. Кроме того, некоторые
микроорганизмы не обязательно сохранятся в жизнеспособном состоянии после покрытия агаром при неблагопри
ятной температуре, что может привести к ложноотрицательным результатам или помешать правильной оценке.
В.3.3 Метод с наиболее вероятным числом (НВЧ)
В.3.3.1 Метод НВЧ — это положительно зарекомендовавший себя и полностью документированный метод
оценки количества жизнеспособных микроорганизмов в том продукте, в котором микроорганизмы распределены
случайным образом. Этот метод особенно подходит для продукта, имеющего биологическую нагрузку с низким
средним числом.
24