ГОСТ Р ИСО 11737-1—2022
Окончание таблицы А.З
Метод
Пример
Специфичность
Селективное культивирова
ние и дифференциальные
среды
Тепловой шок, параметры инкубации,
селективные питательные среды
От умеренной до высокой
Идентификация рода/вида
Генетические и биохимические методы и системы
идентификации
Высокая
А.7 Валидация метода определения биологической нагрузки
А.7.1 Общие положения
В целом классические микробиологические методы представляют собой сложную задачу для пользователя
при валидации по определению биологической нагрузки. Как правило, необходимость валидировать микробиоло
гические методы или методы, описанные в национальных и международных стандартах и фармакопеях, отсутству
ет. Эти методы должны быть проверены только на их точность и надежность в определенных условиях использова
ния. Таких действий обычно достаточно, чтобы подтвердить обоснованность определения биологической нагрузки.
При валидации методов испытаний биологической нагрузки необходимо учитывать два аспекта. Первый —
это способность нейтрализовать ингибирующие факторы в тест-системе, чтобы позволить микроорганизмам раз
множаться (пригодность метода биологической нагрузки), а второй — способность удалять и культивировать ми
кроорганизмы из продукта (эффективность восстановления биологической нагрузки).
Когда методы определения биологической нагрузки включают удаление микроорганизмов из продукта, наи
большее опасение вызывает эффективность процесса удаления. Валидация процесса удаления и культивирова
ния называется эффективностью восстановления биологической нагрузки (подробнее см. приложение С).
А.7.2 Валидация
А.7.2.1 Целесообразность метода биологической нагрузки
Проверку пригодности метода биологической нагрузки используют для демонстрации того, что продукт не
препятствует росту или обнаружению микроорганизмов. Продукт может содержать вещества, ингибирующие ми
кроорганизмы в условиях испытания биологической нагрузки.
При испытании продукта, содержащего антимикробные вещества, следует использовать разведение или
подходящие методы инактивации/нейтрализации.
Ингибирующее действие веществ, элюированных из продукта, должно быть исследовано на стадии предва
рительных экспериментов, чтобы оценить, содержит ли продукт вещества, которые могут вызывать ингибирование
роста микроорганизмов в условиях испытания на биологическую нагрузку. Документальное обоснование может
быть приемлемым, если изделие содержит материалы, которые уже известны или были продемонстрированы как
инертные.
Следует рассмотреть вопрос о пригодности метода биологической нагрузки:
a) когда появляются новые или модифицированные продукты, а также
b
) каждый раз, когда происходит изменение условий проведения испытания (например, условия инкубации,
экстракционные среды).
Применение методов к продуктам с заданной пригодностью для микробоцидных или микробостатических
веществ (например, мембранная фильтрация с валидированной процедурой промывки мембран) не требует про
верки пригодности конкретного продукта методом биологической нагрузки.
А.7.2.2 Эффективность восстановления биологической нагрузки
Существует два основных подхода, доступных для проверки эффективности удаления микроорганизма из
медицинских продуктов (см. С.1.4):
- повторяющееся восстановление: повторная обработка образца продукта с последующей количественной
оценкой степени восстановления;
- инокуляция продукта: продукт инокулируют заданными уровнями микроорганизмов с последующей количе
ственной оценкой степени восстановления.
Первый из этих подходов имеет преимущество при использовании естественных микроорганизмов, но требу
ет умеренной или высокой начальной биологической нагрузки. Если это так, то первый подход может быть предпо
чтительным в зависимости от продукта и/или конфигурации. Второй подход создает модельную систему для целей
испытания, но при этом возникают вопросы применимости к восстановлению естественных микроорганизмов. До
полнительная информация приведена в таблице С.1.
Менее традиционные продукты (например, комплексные или сложные продукты, содержащие порошки, жид
кости, антимикробные агенты, многочисленные компоненты) могут потребовать сочетания подходов оценки эф
фективности восстановления биологической нагрузки. Дополнительная информация приведена в приложении С.
Для жидких продуктов, которые подвержены фильтрованию, или при использовании метода НВЧ определе
ние эффективности восстановления биологической нагрузки и расчет корректирующего коэффициента биологи-
16