ГО С Т Р ИСО 13022— 2016
Для распространения клеток часто используют фетальную бычью сыворотку (fetal bovine serum. FBS). Хоро
шо известно, что FBS может быть заражена вирусами (см. ссыпки [41]. [61]. [62]). Свиной трипсин, часто исполь
зуемый для культивирования клеток, связан с риском заражения. Испытания сыворотки или трипсина, например
заявленные поставщиками в сертификате об анализе (Certificate ofAnalysis. СоА). являются недостаточными для
гарантии отсутствия заражения вирусами: причинами ограниченной значимости испытаний является чувствитель
ность используемых методов выявления и малый объем, который можетбыть использован для испытаний. Необхо
димо избегать использования этих компонентов, если иное не обосновано и документально не отражено. Если
обо сновано. следует использовать инактивированную сыворотку и/или инактивированный трипсин. Если в
качестве добавки к среде применяют человеческую сыворотку, отсутствие загрязнения вирусами должно быть
обосновано соответствующими способами.
При использовании материалов FBS производитель должен продемонстрировать:
a) соответствие ИСО 22442 (все части стандарта); или
b
) сертификат соответствия, принятый EDOM (European Directorate for the Quality of Medicines and Health
Care. Европейским директоратом по качеству лекарственных средств и здравоохранению), или эквивалент.
Поставщик должен предоставить надлежащую документацию, демонстрирующую качество и безопасность
по отношению к вирусам и TSE всех исходных материалов человеческого или животного происхождения. Очень
важно учитывать этот момент с самого начала разработки продукта и вести документацию на все исходные мате
риалы во время различных циклов разработки продукта.
J.3 Методы снижения риска
J.3.1 Тестирование донора человеческих тканей и клеток
Разработаны конкретные требования квыбору и тестированию доноров, например в Европе (см. ссылку [35])
и в США (см. ссылку [53]). Подробности приведены в приложении С. Статус вирусного инфицирования любого кле
точного образца, включая аутогенные клетки, должен быть известен для обеспечения возможности соответствую
щего отделения инфицированных клеток и установления соответствующих мер безопасности при обслуживании и
хранении клеток и материалов.
J.3.2 Испытания банков клеток
Если использованы клеточные линии, по возможности, должны быть установлены соответствующие охарак
теризованные главный банк клеток (Master Сев Bank. МСВ) и рабочий банкклеток (Working Cell Banks. WCB). Банки
клеток, включая характеристику и исследования клеток, должны соответствовать Руководству ICH Q5D (см. ссылку
[17])-
J.3.3 Отбор соответствующих исходных материалов и/или реагентов
Для получения, отбора, культивирования или модификации клеток требуются различные исходные материа
лы или реагенты. Качество биологических материаловдолжно быть документально отражено, и каждое вещество,
используемое в процедуре, должно быть точно определено и оценено в соответствии с предполагаемым исполь
зованием.
Следует учитывать риск загрязнения случайными веществами, и особенно в оценке риска необходимо рас
сматривать все исходные материалы и/или реагенты человеческого или животного происхождения. Основной стра
тегией является избегание использования биологических материалов, если это возможно.
При невозможности, необходимо учитывать следующее.
При росте
in vitro
основных клеток сыворотка является соответствующей добавкой ксреде, и многие клетки
невозможно успешно культивировать без сыворотки. Если для снижения риска заражения рассматривают приме
нение бычьей сыворотки, следует использовать только фетальную бычью сыворотку и. если возможно, инактиви
рованные продукты FBS. Поставщики должны документально подтвердить, что проводимые процедуры инактива
ции эффективны в отношении инактивации вирусов и что перед инактивацией были проведены соответствующие
испытания, которые продемонстрировали, за исключением BVDV. что сыворотка свободна от определяемых бы
чьих вирусов. Было показано, что гамма-излучение 30 кГр или выше эффективно для инактивации вирусов (см.
ссылки [31]. [36]. [40]).
Если используют FBS. должны быть приняты меры для снижения риска
TSE.
Необходимо учитывать соот
ветствующие стандарты, такие как ИСО 22442 (все части стандарта) и руководства (см. ссылку [41]).
Для технологических добавок животного происхождения необходимо учитывать возможную чувствитель
ность пациента, такую как аллергические реакции и/или образование антител.
Риск заражения бычьими вирусами во время культивирования клеток возможно снизить, используя в каче
стве добавок к среде сыворотку человека, однако при этом необходимо принимать соответствующие меры для
предотвращения заражения вирусами человека. В случае лечебных продуктов из аутогенных клеток сыворотка
пациента может подходить для использования в качестве добавки кклеточной культуре.
Для культивирования клеток часто используют трипсин. Он может быть получен из свиных тканей и. следо
вательно. заражен свиными вирусами, особенно свиным парвовирусом и/или свиным цирковирусом типа 1/2. Оба
вируса обладают высокой устойчивостью к тепловой и химической инактивации. Следовательно, если возможно,
необходимо применять инактивированный свиной трипсин растительного происхождения или рекомбинантный
трипсин.
29