ГОСТ ISO 7218—2011
12.5 Применение нуклеиновых зондов для идентификации
Имеющиеся в настоящее время нуклеиновые зонды можно использоватьдля идентификации изоли
рованных колоний.
Необходимо проверить, чтобы нуклеиновые зонды, используемыедля идентификации, были пригод
ны. какпоказывают оценочные исследования, опубликованные в международной научной литературе, пред
почтительно касающейся микробиологии пищевых продуктов. Такая проверка особенно важна, если изго
товитель не предоставляет данных об адекватности этих зондов.
Лаборатория должна получить сертификат контроля на каждую партию с указанием испытанных
штаммов.
Изготовительдолжен также определить контрольные штаммы, которые лаборатория может использо
ватьдля проверки сохранности характеристик биохимических наборов.
12.6 Серологические методы
12.6.1 Общие положения
Если необходима серологическая идентификация, ее выполняют после биохимической идентифика
ции изолированных колоний.
12.6.2 Реакция агглютинации на предметном стекле
Реакция антиген-антитело вызывает слипание бактериальных клеток и образование рыхлых масс
или плотных гранул. В случае бактерий семейства Enterobacteriaceae реакция между «Н» (т. е. флагелляр-
ным) антигеном и гомологичной антисывороткой дает рыхлое слипание, тогда как реакция с участием «О»
(т.е. соматического) антигена дает более плотное слипание в гранулы.
Передреакцией агглютинации сантисыворотками рекомендуется выполнить тест, чтобы определить,
агглютинируют ли бактериальные клетки в растворе хлорида натрия [3 % (по массе)]. Если бактериальные
клетки агглютинируют, штамм является склонным к аутоагглютинации и его не следует использовать в
реакции агглютинации.
Имеющиеся в продаже готовые антисыворотки бывают двух типов:
поливалентная антисыворотка, которая реагирует с микроорганизмами конкретного вида или с груп
пами ссроваров (серотипов бактериальной клетки) и которая пригодна для предварительной идентифи
кации;
специфичные моноклональные антитела, применение которых позволит идентифицировать конкрет
ный серовар.
Лаборатория должна получить сертификат контроля качества на каждую партию антисыворотки с
указанием контрольных штаммов.
Проверяют, чтобы реакция агглютинации на предметном стекле удовлетворяла требованиям данной
задачи, как показывают оценочные исследования, опубликованные в международной научной литературе,
преимущественно касающейся микробиологии пищевых продуктов’*.
При использовании реактивов рекомендуется использовать положительный и отрицательный контро-
ли. удовлетворяющие условиям реакции.
12.6.3 Реакция латекс-агглютинации
Более быстрый метод можно выполнить с имеющимися в продаже наборами, с применением частиц
латекса, покрытых специфичными для группы бактерий антителами (например, для Escherichia coli 0157
см. стандарт ISO 16654 или Staphylococcus aureus в ISO 6888). Антиген в экстракте испытывают против
ряда латексных реактивов.
Проверяют, чтобы агглютинация на латексе удовлетворяла требованиям данного исследования, что
подтверждено в оценочных исследованиях, описанных в международной научной литературе и преиму
щественно связанных с микробиологией пищевых продуктов.
Лаборатория должна получить сертификат контроля качества на каждую партию с указанием
штаммов.
При использовании реактивов следует использовать положительный и отрицательный контроли. удов
летворяющие условиям реакции.
’ ’ Запросы об информации следует направлять в национальные, региональные или международные
справочные центры, указанные для каждого микроорганизма.
45