ГОСТ ISO 7218—2011
крышку стерильной чашки Петри так. чтобы было возможно внести содержимое пипетки вчашку. Расплав
ленную агаровую среду выливают при температуре 44 °С — 47 °С в каждую чашку Петри. Необходимо
наливать расплавленную среду таким образом, чтобы избежать ее попадания непосредственно в инокулят
(посевной материал). Расплавленную среду и инокулят немедленно тщательно перемешиваютдля получе
ния равномерного распределения микроорганизмов в питательной среде. Далее чашки помещают на гори
зонтальную поверхность, чтобы дать время охладиться и затвердеть питательной среде (время затверде
вания агара не должно превышать 10 мин).
После расплавления агаровой среды, доведенной до необходимого состояния, флакон из водяной
бани высушивают сухим чистым полотенцем, чтобы предотвратить загрязнение чашек водой бани. Необ
ходимо следить, чтобы среда не попадала на внешнюю сторону флакона или на внутреннюю часть крышки
чашки Петри во время разливки в чашки.
Для этого флакон или колбу необходимо держать фактически вгоризонтальном положении и воздер
жаться от возврата флакона в вертикальное положение между этапами разливки питательной среды.
Если в исследуемом продукте предполагается присутствие колоний (например, виды Proteus) с «пол
зучим» ростом, используют для анализа слой со стерильным «голодным» агаром или идентичной пита
тельной средой, наносимой на затвердевший агар вчашки с посеянным материалом, чтобы предотвратить
или свести к минимуму распространение такого «ползучего» роста.
10.2.4 Поверхностный посев
10.2.4.1 Общие положения
Методы посева, предназначенные для получения только поверхностных колоний на агаровых чаш
ках. имеют некоторые преимущества по сравнению с методом разливки в чашки для выращивания микро
организмов внутри агара.
Микроорганизмы не подвергаются действию высокой температуры расплавленной агаровой среды,
поэтому количество колоний может быть выше, а подсчет — более точным.
Используют предварительно заполненные агаровой средой чашки, толщина агарового слоя которых
составляет не менее 3 мм. Слой агара должен быть ровным и не содержать пузырьков воздуха и поверх
ностной влаги.
Чтобы облегчить равномерное распределение, поверхность затвердевшего агара необходимо подсу
шить в соответствии с ISO/TS11133 или. как определено другим соответствующим международным стан
дартом. В таком случае посевной материал абсорбируется в течение 15 мин.
10.2.4.2 Метод посева с помощью шпателя
С помощью стерильной пипетки пробы жидкого образца (обычно от0.1 до 0,5 см3) для испытания или
исходной суспензии в случае других образцов переносят на агаровую среду в чашки Петри (диаметром 90
или 140 мм соответственно). Этот шаг повторяют для следующего десятичного разведения (колонии,
подлежащие подсчету, тогда будут представлены встепени разбавления 10 ’ вслучае материала жидкой
пробы и 10”2— в случае материала другой пробы) и. при необходимости, повторяютдальнейшие десятич
ные разведения.
Если необходимо подсчитать незначительное количество микроорганизмов в случае определенных
продуктов, предел обнаружения можно увеличить вдесять раз посредством анализа 1.0 см3пробы в слу
чае жидких продуктов и 1,0 см3исходной суспензии — в случае других продуктов. Для этой цели. 1.0
см3 посевного материала распределяют или по поверхности большой чашки Петри (диаметром 140 мм),
или по поверхностям трех обычных чашек Петри (диаметром 90 мм).
С помощью шпателя, изготовленного изстекла, пластмассы или стали (например, изготовленной из
стекла палочки, изогнутой в форме хоккейной клюшкидиаметром приблизительно 3.5 мм и длиной 20 см.
изгибы выполнены под прямым углом на расстоянии 3 см от одного конца палочки и сплющены на концах с
помощью нагревания) распределяют посевной материал по возможности быстро и равномерно по
поверхности агара, не касаясь боковых стенок чашки Петри. Закрыв чашку крышкой, дают посевному
материалуабсорбироваться в течение 15 мин при комнатной температуре.
В определенных случаях (как указано в соответствующем международном стандарте) посевной ма
териал можно поместить на мембрану и потом распределить по среде, как описано выше.
10.2.4.3 Метод спирального нанесения материала
10.2.4.3.1 Общие положения
Метод спирального нанесения посевного материала для определения уровня содержания микро
организмов проверен в межлабораторных испытаниях молока и молочных продуктов и других пищевых
продуктов.
Используемое оборудование — спиральный дозатор — описан в 5.24.
31