ГОСТ ISO 7218—2011
При использовании центрифугирования полученный осадокповторно растворяют в меньшем объеме
растворителя и продолжают анализ.
Для каждой рассматриваемой комбинации (пищевой продукт плюс микроорганизм) (см., например,
ссылку [23]) необходимо предварительноустановить, является ли введение этапа концентрации необходи
мым и правомерным. Следует оценить способность кфильтрованию суспензии пищевого продукта.
Необходимо также проверить выполнение этапа концентрации вотношении чувствительности, селек
тивности. линейности и воспроизводимости. Если уровень загрязнения неизвестен, параллельно необходи
мо провести исследование стандартным методом (без фильтрации).
9.2.2.2 Иммуноразделение
Если в пробе присутствуют малые количества интересующих микроорганизмов, разделение и кон
центрация микроорганизмов может бытьдостигнута с помощью иммуномагнитных шариков, покрытыхспе
цифическими антителами.
Шарики распределяют вместе с захваченными интересующими микроорганизмами непосредственно
на конкретной плотной питательной среде всоответствии с конкретными нормативными стандартами. Сле
дует проверить, что иммуномагнитные шарики, покрытые специфическими используемыми на этом
этапе концентрации антителами, удовлетворяют требованиям, как показано при оценочных испытаниях,
опубли кованных в международной научной литературе, касающейся, главным образом, микробиологии
пищевых продуктов. Эта проверка особенно важна, если этот метод не был утвержден в соответствии с IS
0 16140.
10 Обработка результатов
10.1 Общие положения
При оценке микробиологической безопасности пищевых продуктов и кормов для животных часто
недостаточно только знать, какие микроорганизмы присутствуют в образце. В большинстве случаев коли
чественный аспект не менее важен, и это требует необходимости подсчета микроорганизмов. Подсчет
можно выполнить различными способами: с помощью прямого определения (микроскопия), посевом на
плотные или жидкие питательные среды, с помощью проточной цитометрии, в полимеразной цепной реак
ции в режиме реального времени и т.д. Однако в настоящем стандарте рассматривается только подсчет
микроорганизмов на плотных и жидких питательных средах.
Подсчет на плотных питательных средах основан на способности многих микроорганизмов продуци
ровать колонии на агаровых питательных средах, которые можно распознать невооруженным глазом или с
помощью простого увеличительного стекла. Однако, если матрица содержит много частиц, которые могут
повлиять на обнаружение колоний, или если количество бактерий очень мало, этот принцип невозможно
использовать без первого отделения искомых микроорганизмов из матрицы (например, фильтрацией или
иммуноразделением). В таких случаях подсчет с использованием жидких питательных сред является
частооптимальной альтернативой.
10.2 Подсчет при использовании плотных питательных сред
10.2.1 Общие положения
Чашка Петри должна быть маркирована этикеткой, на которой указывают номер образца, разведение,
дату посева и другую необходимую информацию.
Необходимо выбрать определенные разведения, чтобы обеспечить получение определенного коли
чества колоний на чашках (см. 10.3.1) и преодолеть возможные ингибирующие свойства.
Для переноса каждого разведения используют отдельную стерильную пипетку, кроме случаев, когда
работу ведут от самого высокого разведения к самым низким разведениям.
10.2.2 Количество чашек Петри на каждое разведение
В микробиологии пищевых продуктов обычно используют одну чашку на каждое разведение микро
организмов согласно требованиям ISO/IEC 17025.
Вдругих случаяхследует использовать две чашки для каждого разведения в соответствии с ISO 8199.
10.2.3 Методы разливки чашек
10.2.3.1 Общие положения
Отбирают определенные объемы разведений для исследования, касаясь наконечником пипетки бо ковой
стенки пробирки, чтобы удалить избыточную жидкость с внешней стороны пипетки. Поднимают
30