ГОСТ ISO 7218—2011
- требуемой точностью и
-другими практическими проблемами.
Неопределенность измерения зависит от числа положительных образцовдля анализа, наблюдаемых
практически одинаковым образом, поскольку неопределенность подсчета колоний зависит от числа коло
ний в чашке. Неопределенность измерения увеличивается какфункция корня квадратного из числа исполь
зованных пробирок. Число пробирок необходимо увеличить в четыре раза для того, чтобы неопределен
ность измерения уменьшилась вдвое. Если используют способы только с небольшим числом дублируе
мых пробирок, неопределенность измерения низкая.
В зависимости от размера образец для анализа можно засевать в пробирки или флаконы, содержа
щие требуемое количество жидкой среды. Для образцов небольшого объема можно использовать также
многолуночные планшеты.
10.5.3.1 Способ одного разведения
Если ожидаемая концентрация микроорганизмов невелика или ожидается ее умеренное изменение,
наиболее подходящим способом посева будет одна серия равных проб для анализа. Там. где ожидаемое
соотношение между максимальным и минимальным количеством микроорганизмов менее 25. десять
параллельных проб для анализа являются наименьшим числомдля работы; для 50 параллельных проби
рок соотношение 200 является предельным. Примеры НВЧ для одного разведения приведены в
таблицах В.1 — В.4. приложения В.
10.5.3.2 Способ нескольких разведений
Если концентрация микроорганизмов в пробе неизвестна или предполагается ее значительное изме
нение. может потребоваться посев на серии пробирок из нескольких разведений. Высеваютдостаточное
число разведений, чтобы обеспечить исследование какс положительными, так и сотрицательными резуль
татами. Число разведений также зависит от метода вычисления, используемого для оценки значения НВЧ.
Если требуется применение таблиц, то необходимо получить результаты от трех разведений, а способы
посева ограничиваются способами, представленными в соответствующих стандартах. При использовании
компьютерных программ число разведений и параллельных пробирок не ограничивается.
10.5.3.3 Симметричный способ посева
В наиболее часто применяемом симметричном способе посевадля определения НВЧ используют три
или пять параллельных пробирок на разведение. Точность, получаемая при применении этого способа,
резко уменьшается по мере уменьшения числа пробирок на разведение. Результаты с использованием
трех пробирок являются не болеечем показателями порядка значения концентрации. Если требуется более
высокая точность, рекомендуется использовать пять или больше параллельных пробирок. Примеры опре
деления НВЧ с использованием трех и пяти пробирок приведены соответственно в таблицах В.5 и
В.7 приложения В.
10.5.3.4 Асимметричный способ
В асимметричных способах используют разное количество пробирок в разных разведениях. Приме
нение такихспособов пригодно только для оценки количества микроорганизмов вчетко заданном диапазо
не. Примеры приведены в ISO 8199.
10.5.4 Термостатирование (инкубирование)
Засеянные пробирки, колбы и флаконы инкубируют втермостате или вводяной бане. Многолуночные
планшеты помещают в термостат.
Выбирают продолжительность и температуру инкубации, получив информацию в соответствующем
стандарте на конкретный метод испытания, поскольку эти параметры зависят от типа рассматриваемого
микроорганизма или группы микроорганизмов.
Для некоторых микроорганизмов может потребоваться термостатирование вдва этапа/или этап под
тверждения. В отношении подробностей см. соответствующие стандарты.
10.5.5 Трактовка результатов
Критериидифференциации положительных и отрицательных результатов различны для каждоготипа
микроорганизма или группы микроорганизмов и определяются в соответствующих стандартах на конкрет
ный метод испытания. Используя эти критерии, подсчитывают и записывают число положительных резуль
татов. полученных во всех образцах для анализа, взятых из одной лабораторной пробы.
10.5.6 Определение значений НВЧ
Существует три различных варианта определения значения НВЧ: вычисление по математическим
формулам, сопоставление с таблицами НВЧ или применение специальных компьютерных программ. При
39