ГОСТ ISO 7218—2011
Необходимо соблюдать меры предосторожности и проводить работу, насколько это возможно, в сте
рильных условиях. Например:
a) требуется удостовериться, что рабочая зона находится в чистом состоянии, а все возможные
источники загрязнения удалены или сведены к минимуму и отсутствуют сквозняки (то есть двери и окна
закрыты). Следует избегать ненужных перемещений персонала во время исследования;
b
) перед началом и после работы необходимо провести обеззараживание рабочих поверхностей соот
ветствующим дезинфицирующим средством;
c)до начала работы следует убедиться, что все необходимые материалы и оборудование для выпол
нения работы являются доступными;
d) работу необходимо выполнять без задержек;
e) следует разделить «чистую» и «грязную» работу вовремени и по месту выполнения (это особенно
важно при работе с образцами высокого риска, такими как сырое мясо и сырые яйца);
f) для работы обычно используют одноразовое оборудование;
д) если содержимое упаковки с одноразовыми пипетками, чашками Петри и другими необходимыми
инструментами не используют полностью в процессе анализа, необходимо проследить, чтобы упаковка
была надлежащим способом закрыта после изъятия необходимого количества инструментов;
h) любой зараженный материал, попавший на поверхность рабочего места, немедленно обрабатыва
ют с помощью ватных хлопковых тампонов или любого другого подходящего, пропитанного 70 %-ным (по
объему) спиртом или любым другим подходящим дезинфицирующим средством. Затем рабочее место
моют и дезинфицируют, после чего продолжают исследование;
i) для продуктов, которые могут содержать патогенные бактерии, используют бокс биологической
безопасности, если это оговаривается национальным регламентом;
j) при извлечении стерильной пипетки из упаковки не позволяют наконечнику касаться наружных
поверхностей пипеток, остающихся в упаковке, потому что такие поверхности могут стать причиной конта
минации наконечника;
k) пипетка не должна прикасаться к ободкам или горлышкам колб или флаконов, используемых для
разведений.
Аэрозоли — главная причина загрязнения окружающей среды и инфекции. Например, аэрозоли мо
гут формироваться следующим образом;
- при открытии чашек Петри, пробирок и флаконов;
- при использовании шейкеров, шприцов, центрифуг и т. д.;
- при опорожнении пипеток;
- при стерилизации влажных петель и игл;
- при открывании ампул, содержащих высушенные замораживанием культуры.
Поэтому их формирование необходимо свести к минимуму.
При использовании молекулярных методов необходимо соблюдатьдополнительные меры предосто
рожности в соответствии с ISO 22174.
Когда используют другие дезинфицирующие средства, а не 70%-ный (по объему) спирт, для эффек
тивной дезинфекции необходимо установить время контакта всоответствии с инструкциями изготовителя.
9.2 Приготовление исходной суспензии и разведений
9.2.1 Общие положения
Исходную суспензию и разведения приготавливают согласно соответствующей части ISO 6887 или
ISO 8261. Интервал времени, занимающий конец подготовки исходной суспензии и момент инокуляции
посевного материала в питательную среду, недолжен превышать45 мин, если специально не оговаривает
ся в соответствующем стандарте.
За этапом приготовления исходной суспензии и получения разведений может следовать этап обога
щения в соответствии с конкретными стандартами.
9.2.2 Концентрирование
9.2.2.1 Центрифугирование или фильтрация с помощью мембранного фильтра
Если требуется подсчет малого числа микроорганизмов, подсчет может быть улучшен как с точки
зрения чувствительности, так и точности посредством введения дополнительного этапа концентрации
образца для анализа. Концентрация при этом может бытьдоститута центрифугированием или фильтраци ей
на мембранных фильтрах.
29