ГОСТ ISO 7218—2011
Верхний и нижний пределы 95%-ногодоверительного интервала можно аппроксимировать соответ
ственно умножением и делением НВЧ на антилогарифм 2
SE.
Такое вычисление приводит к завышению
верхнего предела.
10.5.6.2Таблицы НВЧ
10.5.6.2.1 Таблицы для одного разведения
Таблицы В.1 — В.4, приложение В. дают значения НВЧ и 95%-ныедоверительные интервалы на обра
зецдля анализадля 10.15.20 и 25 параллельных пробирок [каждая пробирка засеяна материалом (одного)
разведения].
Чтобы подсчитать итог на контрольную массу образца (или объем для жидких образцов), умножают
НВЧ и предельные значения 95%-ногодоверительного интервала на отношение (контрольная масса^[мас
са пробы для анализа(навески)]. Нельзя умножать на логарифмическую стандартную неопределенность.
За контрольную массу в микробиологических исследованиях обычно берется 1 г. Масса образца для ана
лиза (навеска)соответствует количеству образца (в граммах), которое представлено вобъеме, использо
ванном для засева пробирок.
Пример
—
(Ссылка [30]).
Двадцать пробирокс бульоном двойной крепости (концентрации) были засеяны аликвотамипо
5см3 десятикратно разбавленной пробы (0,1г/5см3). После термостатирования 16пробирокиз 20пока
зализаметный рост. Какова быланаиболеевероятная бактериальнаяплотность (организмов награмм) в
пробе? Таблица В.Здаетзначение 1,61какнаиболее вероятное число(НВЧ)организмов на пробиркупри
нижнем пределе 95%-ного доверительного интервала, равном 0,93, и верхнем пределе, равном 2,77.
В каждую пробирку было добавлено 5 см3пробы для анализа, что соответствует 0.5 г пробы. Следо
вательно. наиболее вероятное число микроорганизмов в 1 г пробы будет задаваться
1R1
MPN = -jjg- на грамм = 3.2 на г со следующим 95%-ным доверительным интервалом:
нижний предел 95%-ногодоверительного интервала =
093
на грамм = 1.9 на грамм:
верхний предел 95%-ногодоверительного интервала =на грамм = 5,5 на грамм.
10.5.6.2.2 Таблицы для нескольких разведений: три последовательных разведения
Для симметричных способов общей практикой является использование трех последовательных раз-
ведений с тремя (таблица В.5) или пятью параллельными пробирками (таблица В.7) в каждом разведении.
Записывают число положительных пробирокдля каждого набора пробирок и по таблице НВЧ для использо
ванного способа посева подсчитывают наиболее вероятное число (НВЧ) микроорганизмов, присутствую
щих в контрольном объеме образца.
Некоторые комбинации положительных пробирок встречаются чаще, чем другие. Например, комби нация
положительных пробирок 0, 0, 3 встречается гораздо реже комбинации 3, 2.1. Чтобы выразить коли
чественноэту вероятность, все комбинации положительных результатов классифицируют по категориям от
0 до 3. Результат категории 1 является результатом с более высокой вероятностью, тогда как результат
категории 3 более редкий и его сложно воспроизвести. Наиболее худшим вариантом являются результаты
категории 0: эти результаты рекомендуется принимать с большим сомнением. Предполагая, что резуль
таты анализа верны, можно ожидать, что 95 % из наблюдаемых комбинаций попадут в категорию 1. в кате
горию 2 — 4 %. в категорию 3— 0,9 % и только 0.1 % — в категорию 0. Категории поясняются втаблице В.6.
В варианте, где используется более трех разведений, выбор «правильной» комбинации трех последо
вательных разведений не всегда очевиден. Однако выбор можно легко сделать путем записи всех возмож
ных комбинаций положительных пробироки выбора соответствующей категории по таблице В.5.
После этого применяют следующие правила:
1) Выбирают комбинации трех последовательных разведений, имеющих профиль категории 1, чтобы
получить индекс MPN. Если получится более одной комбинации, имеющей профиль категории 1. использу ют
ту комбинацию, которая имеет самое большое число положительных пробирок.
2) Если не имеется комбинации, имеющей профиль категории 1. используют комбинацию, имеющую
профиль категории 2. Если имеется несколько комбинаций, имеющих профиль категории 2. используют ту
комбинацию, которая имеет самое большое число положительных пробирок.
3) Если не имеется комбинации, имеющей профиль категории 2. используют комбинацию, имеющую
профиль категории 3. Если получено несколько комбинаций, имеющих профиль категории 3. используют ту
комбинацию, которая имеет самое большое число положительных пробирок.
Некоторые примеры показаны втаблице 1.
41