ГОСТ Р ИСО 10993-10—2009
1
1—голова; 2 — 0.1 мл вмутрикожнзя инъекция
(см. 7.4.4.3.1); 3 — высфижеммая внутриполаточная
область; 4 —хвост
Рисунок 2 — Расположение участков внутрикож-
4
ной инъекции
7.4.4.3.2 Местная индукционная фаза
Через семьдней (± 1 день) после внутрикожиой индукционной фазы начинают накожные апплика
ции исследуемого материала на участки инъекций, на внутрилопаточную область каждого животного,
используя для этого пропитанные кусочки фильтровальной бумаги или марли площадью 8 см2.
При этом используют концентрацию согласно 7.4.4.3.1 для участка В. Если максимальная концен
трация. которая может бытьдостигнута в 7.4.4.3.1. не вызывает раздражения, предварительно обраба
тывают область аппликации 10 %-ным раствором натрия додецил сульфата, вмассироеав в кожу за
(24 ♦.2) ч до аппликации. Накладывают окклюзионную повязку. Удаляют повязку через (48 i 2) ч.
Предпочтительны свежеприготовленные экстракты. Если экстракты приготовлены ранее чем за
24 ч, то стабильность экстрактов при хранении должна быть проверена.
Процедуру с контрольными животными повторяют в том же режиме, используя только контроль
ный раствор.
7.4.4.3.3 Провокационная фаза
Через 14дней (± 1день) после завершения местной индукционной фазы провоцируют всех опыт
ных и контрольных животных испытуемым материалом. Для этого проводят аппликации исследуемого
материала в концентрации согласно 7.4.4.3.1 для участка С на интактные участки кожи бока каждого
животного, используя фильтровальную бумагу или гигроскопичную марлевую подушечку. Разбавления
этой концентрации могут также быть наложены к другим интактным участкам подобным образом. Нак
ладывают фиксирующую окклюзионную повязку. Удаляют повязку и аппликации через (24 ♦2) ч.
7.4.5 Обследование животных
Осматривают поверхность участков, где проводили провокационную пробу подопытных и кон
трольныхживотных, через 24:48 ч после снятия повязки. Для визуализации реакций кожи рекомендуют
использование естественного или освещения с полным спектром.
Описывают и оценивают степень кожной реакции, включая эритему и отек, в соответствии с таб
лицей 4 (по Magnusson и Kligman) для каждого участка и в каждый интервал времени наблюдения.
Настоятельно рекомендуется, чтобы описание было сделано без учета предварительного воздей
ствия, чтобы минимизировать погрешность в оценке результатов.
7.4.6 Оценка результатов
Если оценка в баллах, полученная в подопытной группе, равна 1 или выше, о наличии сенсибили
зации говорят в том случае, если у контрольных животных этот показатель менее 1балла. Если оценка в
баллах у контрольных животных равна 1 или выше, то реакция кожи подопытных животных, которая
превышает самую сильную реакцию, наблюдаемую в контроле, является результатом сенсибилиза
ции.
Если реакция сомнительная, проводят дополнительную провокационную пробу. Результат испы
тания может быть представлен как частота положительных результатов провокационной пробы в
опытной и контрольной группах.
Иногда в подопытной группе у большего, чем в контроле, числа животных выявлена ответная
реакция, однако интенсивность реакции не выше, чем у контрольных животных. В этом случае прово
дят дополнительную провокационную пробудля получения более четкого ответа организма. При необ
ходимости дополнительную провокационную пробу проводят в срок от 1 до 2 нед после первой
провокации. При этом применяют описанный выше метод, используя другой бок животного.
14