ГОСТ Р ИСО 10993-10—2009
7.2.2 Индукционная фаза
Скорость сенсибилизации в большой степени зависит от индукционной дозы, которая должна
вызывать умеренное раздражение кожи. Если порог раздражения кожи не достигнут, то выбирают
более высокую концентрацию, но которая не должна сказываться на здоровье животного. Индукцион
ную дозу выбирают наоснове предварительных экспериментов. Неразбавленные экстракты на основе
известных растворовдля парентерального введения ненуждаются в предварительных исследованиях.
7.2.3 Провокационная фаза
Концентрацию провокационной пробы также определяют в ходе предварительных эксперимен
тов на животных, ранее не подвергавшихся воздействию исследуемого материала. Концентрация про
вокационной пробы должна быть ниже порога концентрации, вызывающей раздражение кожи.
Рекомендуется использовать более чем одну концентрацию для провокационной пробы для того, что
бы сделать более легкой оценку результатов (см. С.2 приложения С).
7.3 Прочие факторы, влияющие на полученные результаты исследований
При выборе метода учитывают биохимические и физические характеристики исследуемого мате риала.
Метод максимального воздействия требует внутрикожного введения, следовательно, если
исследуемый материал нельзя ввести внутрикожно, необходимо использоватьальтернативный метод.
Выбранный растворитель должен повышать чувствительность метода благодаря частичному
растворению материала ипроникновению вболее глубоколежащие слои кожи. Концентрация исследу
емого материала должна быть максимально возможной, но не оказывать влияния на интерпретацию
результатов. Важным фактором при местном воздействии является концентрация материала на
поверхности кожи, а не его объем. Большинство исследователей предпочитает растворы, потому что
дисперсии склонны к образованию осадка, что затрудняет точное дозирование. Примерами носителей
для внутрикожной инъекции служат солевой раствор, пропиленгликоль и растительное масло.
Расхождение в результатах, полученных разными лабораториями, возможно по нескольким при
чинам. В процедуре испытаний важно следующее: окружающие условия, место испытания на живот
ном. методудаления волос или химическойдепиляции, тип пластыря, объем исследуемого материала,
качествоокклюзии, время экспозиции иосмотра животных. Реактивностьживотныхтакже изменяется в
зависимости от генетических факторов и сезонных колебаний.
Сравнение подопытных животных с положительной реакцией с животными контрольных групп
дает возможность адекватно выявить положительную реакцию, при этом тяжесть возникших патологи
ческих изменений также имеет значение для интерпретации результатов. Пограничные реакции в
спорных случаяхлучше всего разрешаются повторным исследованием. Гистопатологические исследо
вания. как показано, не помогают в оценке результатов.
Чтобы гарантировать воспроизводимость и чувствительность испытательной процедуры, тесты с
известными контактными аллергенами, например меркаптовензотиазолом (mercaptobenzothiazole),
гексилом коричным альдегидом (hexyl cinnamic aldehyde) и бензокаином (benzocaine), должны регуляр но
выполняться.
7.4 Метод максимального сенсибилизирующего воздействия
7.4.1 Цель исследования
Исследование проводятдля определения потенциальной способности материала оказыватьсен
сибилизирующее действие на кожу морских свинок.
7.4.2 Подготовка исследуемого материала
Твердые вещества (включая порошки) или жидкость готовят к исследованиям в соответствии с
приложением А. Концентрация пробы должна быть максимально возможной, но не мешать интерпре
тации результатов (см. 7.4.4.2).
7.4.3 Экспериментальные животные и их содержание
Используют здоровых молодых половозрелых морских свинок-альбиносов одной линии, любого
пола, массой до начала эксперимента 300—500 г. В эксперименте не используют беременных самок
или животных после спаривания.
Акклиматизацию и содержание животных осуществляют в соответствии с ИСО 10993-2.
Предварительные тесты должны быть выполнены на одном наборе животных, чтобы определить
оптимальные концентрации для исследования (см. 7.4.4.2).
Для исследования порошкообразных или жидких материалов используют не менее 10 животных
на каждый исследуемый образец, и не менее пяти животных составляют контрольную группу. Для про
ведения предварительных исследований используют дополнительное число животных.
12