ГОСТ Р ИСО 15883-1 — 2008
Приложение С
(обязательное)
Методы испытаний для обнаружения и оценки остаточного протеиназного загрязнения
С.1 Нингидринный метод обнаружения остаточного протеиназного загрязнения
С.1.1 Общие положения
Большая часть загрязнения, которое возникает на медицинских устройствах многократного пользования,
является в целом или частично протеиназным по характеру. Изложенный метод обеспечивает тест до отказа с
высоким уровнем чувствительности на протеины и аминокислоты. Для справки см. (19) и {34].
П р и м е ч а н и е — Чувствительность испытания является достаточной, чтобы обнаруживать глицин в
концентрации 2 мг/м2.
С.1.2 Оборудование и материалы
Оборудование и материалы должны включать в себя:
- ватные тампоны (пластиковые ручки):
- 2 % — нинтидрин в 70 % — изопропаноле:
-дистиллированную воду;
-духовку (110 *С).
С. 1.3 Процедура
Намочите тампон стерильной дистиллированной водой и используйте его для протирки поверхностей ис
пытуемых инструментов. Обеспечте. чтобы протертый участок был не меньше пяти и не больше 50 см2.
После протирки инструмента осмотрите тампон. Любое изменение цвета показывает, что инструмент не
был чистым, поэтому нет необходимости продолжать протирку дальше.
Капните одну каплю (приблизительно 0.05 см3) реактива нинтидрина на тампон и дайте ему возможность
высыхать на воздухе приблизительно 5 мин. Если появляется розовая окраска, то обнаружены остаточные проге-
ин,’аминокислоты и дальнейшие действия не требуются.
Если окраска не появилась, перенесите тампон в духовку, нагревайте при температуре 100 "С— 110 “С
30 мин и снова осмотрите тампон на розовую окраску.
Проведите позитивный и негативный контрольдля каждой серии выполненных тестов.
С. 1.4 Приемочные критерии
При испытании всоответствии с С.1.3 не должно быть:
- никакого изменения цвета тампона до применения нингидринного реактива;
- видимого розового обесцвечивания тампона после применения нингидринного реактива.
С.1.5 Аспекты безопасности
Должна применяться информация, предоставляемая производителем химикатов, например в справоч
ном листе по безопасности, а также необходимо носить средства индивидуальной защиты.
С.2 Метод ОРА для оценки остаточного белкового загрязнения
С.2.1 Общие положения
Метод орто-фталиевого диальдегида (ОРА) является количественным методом для определения свобод
ных первичных аминогрупп протеинов. Орто-фталиввый диальдегид вприсутствии Л/.Л/-диметил-2-меркапто-этил-
аммониевого хлорида с а- и г- аминогруппой образует устойчивый люминисцентный алкилтио-2-алкилизоиндол,
который обнаруживается спектрометрическим методом на длине волны 340 нм. Для справки см. (20) и [21].
С.2.2 Оборудование и материалы
Оборудование и материалы должны включать в себя:
- ультрафиолетовый’визуальный спектрометр (UV/VIS);
- кварцевую кюветку на 1мл:
- колпачки для кюветок;
- додецилсульфат натрия (SDS);
- о-фталиевый диальдегид;
- А/.Л/-диметил-2-меркапто-этил-аммониевый хлорид;
- 0.1 М двунатриевый тетраборатный буфер;
- метанол;
- полиэтиленовый мешок, полиэтиленовую, полипропиленовую или стеклянную трубку;
- химический стакан;
- шприц;
- силиконовый трубопровод.
С.2.3 Процедура
Для отбора проб мойте поверхность испытуемого инструмента в небольшом объеме (5 см3) 1 %-ного ра
створа SDS в течение 30 мин. Для проверки на загрязнение наружной поверхности в целом поместите инструмент в
полиэтиленовый мешок. Затем долейте 5 см3раствора SDS. герметически закройте мешок и энергично перело
жите с одной руки на другую несколько раз. чтобы убедиться в доступе раствора SDS ко всем поверхностям.
48