ГОСТ Р 57221—2016
100 мг/100 см3;устанавливают pH среды 7.0—7,2 раствором гидроокиси натрия с массовой долей 20 %;
кжидкому ферментолизату добавляют 5 г хлористого натрия и нагревают на слабом огне при постоян
ном помешивании до полного растворения ингредиентов.
Приготовленный бульон фильтруют через ватно-марлевый фильтр, устанавливают слабощелоч
ную реакцию (pH 7,0—7.2) идобавляют 20 г агара. После добавления агара жидкость кипятят на слабом
огне при постоянном помешивании до полного растворения агара. Приготовленную среду
фильтруют через ватно-марлевый фильтр, разливают в колбы и стерилизуют в автоклаве при
температуре 120 =С в течение 20 мин.
20.3 Проведение испытания
В стерильную пробирку фламбированным шпателем берут навеску продукта массой 1 г.
Разведения для посевов готовят следующим образом; к навеске массой 1 г добавляют 9 см3фи
зиологического раствора pH 7.0 и тщательно перемешивают стерильной пипеткой до получения одно
родной суспензии. Из первого разведения 1:10 готовят последующие разведения 1:100 и т. д. Порядок
разведения выбирают в зависимости от предполагаемой обсемененности продукта, с тем чтобы на
чашках развивалось 30—300 колоний бактерий. Для приготовления первого разведения используют
пипетку с расширенным концом.
Посев проводят из двух-трех (а в отдельных случаях более) последовательных 10-кратных раз-
ведений. Каждое разведение высевают на 2—3 чашки Петри. По 1 см3 суспензии вносят в чашку с
заранее маркированным дном и заливают не позднее чем через 15 мин. 12—15 см3 расплавленного и
охлахеденного до температуры 45 °С мясо-пептонного агара или одной из сред, указанных в п. 20.1.
Сразу после заливания среды содержимое чашки тщательно перемешивают путем вращательного по
качивания для равномерного распределения посевного материала.
Для того чтобы помешать развитию на поверхности агара спорообразующих микробов и бактерий
протея, допускается наслоение расплавленного и охлажденного до температуры 45—50 °С голодного
агара толщиной 3— 4 мм.
После застывания среды чашки Петри переворачивают крышками вниз и инкубируют в термоста
те при температуре 37 °С в течение 48 ч.
20.4 Обработка результатов
Количество выросших колоний подсчитывают через 24—48 ч в каждой чашке, поместив ее вверх
дном в приборе для счета колоний бактерий.
Оценку результатов проводят по посеву того разведения, в котором количество выросших колоний
на чашках составляет от 30 до 300. По результатам подсчета вычисляют среднее арифметическое зна
чение числа колоний во всех посевах этого разведения. Если же не в одном, а в двух следующих
друг за другом разведениях количество колоний на чашках находится в пределах 30—300. то
подсчитывают количество бактерий в продукте по результатам подсчета колоний в каждом из
разведений раздельно и вычисляют среднее арифметическое значение, если полученные результаты
не отличаются друг от друга более чем вдва раза. В противном случае результаты посева
оценивают по результатам высева наибольшего разведения.
Количество бактерий в 1 г продукта вычисляют умножением среднего арифметического значения
числа колоний на соответствующее разведение навески.
21 Метод выявления бактерий рода сальмонелла
21.1 Аппаратура, материалы, реактивы и среды
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г — по
ГОСТ 22280.
Автоклав или стерилизатор.
Баня водяная с терморегулятором.
Микроскоп световой биологический типов I, III — по (3).
Термостат электрический с автоматическим терморегулятором.
Шкаф сушильный лабораторный.
Колбы конические плоскодонные вместимостью 50. 100. 500 см3— по ГОСТ 25336.
Пипетки вместимостью 1. 2. 5.10 см3— по ГОСТ 29227.
39