ГОСТ Р 57221—2016
Номер полоски
Количество лизина, мкг
1
10
2
20
3
25
4
35
5
50
6
0
10.2.4 Приготовление водного раствора глицерина
В стеклянной колбе или склянке с пришлифованной пробкой смешивают один объем глицерина с
четырьмя объемами дистиллированной воды.
Раствор хранят в холодильнике 2 мес.
10.2.5 Приготовление раствора соляной кислоты концентрации с(НС1) = 6 моль/дм3 (6 н.)
Встеклянной колбе или склянке с пришлифованной пробкой смешивают соответствующие в зави
симости от плотности концентрированной соляной кислоты объемы этой кислоты и дистиллированной
воды.
10.2.6 Приготовление раствора гидроокиси натрия концентрации c(NaOH) = 6 моль/дм3(6 н.)
В фарфоровый сосуд отвешивают гидроокись натрия идобавляют дистиллированную воду. После
растворения гидроокиси натрия раствор охлаждают и переливают в мерную колбу. Затем к раствору
порциями добавляют дистиллированную воду, постепенно доводя объем раствора до метки. После
добавления каждой порции раствор перемешивают и. если произошло нагревание, раствору дают ох
ладиться. Для получения 250 см3 раствора берут 60 г гидроокиси натрия и 200 см3дистиллированной
воды. Для получения других объемов раствора гидроокиси натрия концентрации c(NaOH) = 6 моль/дм3
(6 н.) количество гидроокиси натрия и воды рассчитывают.
10.2.7 Приготовление стандартных растворов лизина
10.2.7.1 Раствор, содержащий 2.5мг/см3лизина
В стаканчик для взвешивания отвешивают (0.078 ± 0.001) г монохлорида лизина или соответ
ствующее количество дигидрохлорида (результат записывают с точностью до четвертого десятичного
знака). Навеску соли количественно переносят дистиллированной водой в мерную колбу вместимостью
25 см3, монохлориду дают раствориться, раствор в колбе доводят до метки 25 см3дистиллированной
водой и перемешивают.
10.2.7.2 Раствор Б. содержащий 1,0мг/см3лизина
От раствора А пипеткой вместимостью 10 см3 отбирают 10 см3 раствора, переносят в мерную
колбу вместимостью 25 см3,доводят дистиллированной водой до метки 25 см3 и перемешивают.
Стандартные растворы лизина хранят в холодильнике не более месяца.
10.2.8 Построение градуировочного графика
Из листа фильтровальной бумаги вырезают шесть полосок длиной 5 см и шириной 0.5 см. которые
нумеруют карандашом.
На полоски примерно на середине микрошприцем или автоматической пипеткой наносят капли
растворов: на первую полоску — 10 мкл раствора Б.
на вторую — 20 мкл раствора Б. на третью — 10
мкл раствора А. на четвертую — по 10 мкл рас творов
А и Б. на пятую — 20 мкл раствора А и на шестую
— 20 мкл дистиллированной воды. После на несения
растворов и воды полоски по очереди берут пинцетом
и сушат в токе теплого воздуха.
Количество лизина на полосках фильтровальной
бумаги должно соответствовать указанному втаблице.
Для построения градуировочного графика до
пускается использование и других количеств лизина.
Участок бумаги, занятый пробой, вырезают и
1
помещают в пробирки вместимостью 5 см3 с пришлифованными пробками. Затем в каждую пробирку
добавляют пипеткой 1,2 см3фурфурольного реактива, пробирки плотно закрывают пробками, помеща
ют вводяную баню, предварительно нагретую до 95 вС. и выдерживают при этой температуре втечение 40
мин. Затем пробирки вынимают из бани, быстро охлаждают, опустив пробирки в баню с холодной водой
или помещая их под струю воды из водопровода. После охлаждения сразу в каждую пробирку пипеткой
приливают по 2 см3 раствора глицерина и содержимое пробирок тщательно перемешивают.
Далее раствор слсктрофотометрируют. измеряя поглощение света на длине волны 540 нм в кю
ветах с длиной поглощающего слоя 5 мм. В кювету сравнения наливают раствор, приготовленный, как
раствор 6 . чо без помещения в пробирку фильтровальной бумаги.
Для каждого количества лизина готовят две параллельные пробы.
За окончательный результат величины оптической плотности каждого раствора лизина принима
ют среднюю арифметическую величину двух параллельных определений, значения которых недолжны
отличаться от средней величины более чем на 5 %. рассчитанных до целого числа.
14