ГОСТ Р 57221—2016
Из первого разведения 1:10 готовят ряд десятикратных разведений до такой степени, чтобы мож
но было определить предполагаемое количество дрожжей в 1 г исследуемого продукта.
Высевают по 1 см3 каждого разведения в две стерильные чашки Петри. В каждую чашку, содер
жащую инокулум. наливают не позднее чем через 15 мин. 12—15 см3 сусло-агара, охлажденного до
{45 ± 1) °С. При необходимости в сусло-агардобавляютантибиотикокситетрациклин или стрептомицин.
Среду немедленно тщательно перемешивают и оставляют до застывания. После застывания среды
посевы инкубируют крышкой вниз при температуре 30—32 °С в течение 5 сут. Через 3 сут. инкубирова ния
проводят предварительный учет типичных колоний, а через 5 сут. — окончательный, наблюдая за ростом
дрожжей визуально, при необходимости и микроскопически.
19.3 Обработка результатов
Для подсчета используют посев того разведения, где на чашках выросло от 15 до 150 колоний
дрожжей. По результатам подсчета вычисляют среднее арифметическое значение числа колоний во
всех посевах этого разведения. Если же не водном, а вдвух следующих друг за другом разведениях ко
личество колоний на чашках находится в пределах 15—150, то подсчитывают число колоний в каждом из
разведений раздельно и вычисляют среднее арифметическое, если полученные результаты не отли
чаются друг от друга более чем в два раза. В противном случае результаты оценивают по результатам
высева наибольшего разведения.
Количество дрожжей в 1 г продукта вычисляют умножением среднего арифметического значения
числа колоний на соответствующее разведение навески.
20 Метод определения общей бактериальной обсемененности
20.1 Аппаратура, растворы и реактивы
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г — по
ГОСТ 22280.
Прибор для счета колоний бактерий.
Термостат электрический с автоматическим терморегулятором.
Баня водяная.
рН-метр.
Электроплитка с регулятором температуры или электронагреватель.
Автоклав или стерилизатор.
Микроскоп световой биологический типов I. Ill — по [3].
Шпатель металлический.
Пробирки вместимостью 25 или 50 см3— по ГОСТ 25336.
Чашки Петри — по ГОСТ 25336.
Пипетки вместимостью 1 см3— по ГОСТ 29227; конец пипетки для анализа предварительно рас
ширяют.
Колбы конические вместимостью 250. 500 и 750 см3— по ГОСТ 25336.
Стекла предметные — по ГОСТ 9284.
Стекла покровные — по ГОСТ 6672.
Агар микробиологический — по ГОСТ 17206.
Агар питательный сухой или агар мясо-пептонный (готовят по ГОСТ 10444.1) или агаризованная
среда на основе ферментолизата микроорганизмов (готовят по п. 20.2.1 настоящего стандарта).
Агар голодный; готовят по ГОСТ 10444.1.
Раствор физиологический pH 7,0: готовят по ГОСТ 10444.1.
Ферментолизат биомассы микроорганизмов осветленный.
Натрия гидроокись — по ГОСТ 4328. раствор с массовой долей 20 %.
Натрий хлористый — по ГОСТ 4233.
Вода дистиллированная.
20.2 Подготовка к испытанию
20.2.1Приготовление агаризованной среды на основе ферментолизата биомассы микро
организмов
Среду готовят, исходя из содержания аминного азота в порошке ферментолизата. Необходи
мое количество порошка разводят в 1 дм3 водопроводной воды до содержания аминного азота около
38