ГОСТ ISO 15883-1—2011
С.2.3 Процедура
Для отбора проб мойте поверхность испытуемого инструмента а небольшом объеме (5 см3) 1 %-ного раство
ра SDS в течение 30 мин. Для проверки на загрязнение наружной поверхности в целом поместите инструмент а по
лиэтиленовый мешок. Затем долейте 5 см
3
SDS. герметически закройте мешок и энергично переложите с
одной руки на другую несколько раз. чтобы убедиться а доступе раствора SDS ко всем поверхностям.
Для испытания внутренних поверхностей, например каналов минимально инвазионных хирургических
инструментов, зажмите к стойке инструмент так, чтобы его отдаленный от центра конец стоял на основании хими
ческого стакана. Присоедините одноразовый шприц к другому концу канала инструмента, используя отрезки сили
коновой трубки. После добавления 5 см
1
1 %-ного раствора SDS в каждый химический стакан, промойте каждый
световой канал несколько раз путем всасывания раствора и опустошения шприца.
Для приготовления раствора реактива ОРА растворите 40 мго-фталиевого диальдегида в 1см
3
метанола, за
тем добавьте 50 см
3
0.1 М двунатриевого тетраборатного буфера (pH 9.3). 100 мг М.А
Л
диметил-2-меркапто-этил-ам-
мониеаого хлорида и 1,25 см
3
водного 20 %-ного (массовая фракция) раствора SDS.
Перед каждым измерением однолучевым спектрофотометром делайте регулирование нуля с 1 см
3
раствора
реактива ОРА в кварцевой кюветке. Если используется спектрофотометр, генерирующий два луча, то поместите
кюветку с раствором реактива ОРА во второй луч в качестве опорного нуля на протяжении испытания.
Для определения протеина добавьте 100 см
3
элюата 1 %-ного раствора SDS к 1см
3
свежеприготовленного рас
твора реактива ОРА в кюветке. Закройте кюветку колпачком итщательноперемешайте растворы путем взбалтывания.
Определите затухание через 3 мин.
Л
юбая турбулентность элюата SDS или отпечаток пальца на колпачке кюветки приведут к неверному резуль
тату. Пластиковые материалы следует тестировать для определения, что они не выделяют пластификаторы, кото
рые влияют на реакцию ОРА.
Значение затухания менее 0,020 является показателем низкого уровня протеиназного остаточного загрязнения.
Проведите позитивный и негативный контроль для каждой серии выполненных тестов.
Остаточное загрязнение может быть выражено в микромолях аминогрупп, чувствительных к ОРА. из расчета
на 1 см
3
и 5 см31 %-ного SDS раствора, использованного для выборки. Для вычисления этого значения можно ис
пользовать 6.42 л/ммолы’см как коэффициент поглощения, т. е. 0.1 микромоль аминогрупп, чувствительных к ОРА.
дают затухание 0.642.
В вычислениях присутствующего остаточного загрязнения следует принимать во внимание коэффициент
разбавления.
С.2.4 Приемочные критерии
При испытаниях а соответствии с С.2.3 значение затухания должно быть менее 0.020.
С.2.5 Аспекты безопасности
Должна применяться информация, предоставляемая производителем химикатов, например в справочном
листе по безопасности, а также необходимо носить подходящие средства индивидуальной защиты.
С.З Полуколичественный белковый анализ с использованием биуретного метода
С.3.1 Общие положения
Биурет как метод с использованием бицинхониноаой кислоты (ВСА) подходит для определения протеинов,
содержащих не менее двух пептидных связей (СО — NH). В щелочном растворе со специфическим показателем pH
атомы азота (N) пептидной цепочки сопрягаются с ионами меди, снижая Си2’до Си". Затем Си"образует интенсив
ную фиолетовую окраску с бицинхониноаой кислотой. Интенсивность окраски зависит от количества присутствую
щего протеина. Если протеин не присутствует, то реактив ВСА превращается из голубого в яблочную зелень,
которая является комплексом ВСА и Си2’. Для справки смотрите (22) и (23).
Биуретный метод может быть использован как полуколичественный метод для определения остатков проте
ина на медицинских устройствах, которые прошли обработку а МД машине.
П р и м е ч а н и е — Тестовые комплекты, использующие этот биуретный/ВСА метод, или модифицирован
ная обратная реакция, которая дает равные результаты, являются доступными для приобретения.
С.3.2 Оборудование и материалы
Оборудование и материалы должны включать в себя:
- химикаты: бицинхониновую кислоту, карбонат натрия, тартрат натрия, гидроокись натрия, водородный кар
бонат натрия, пентагидрат сульфата меди, додецилсупьфат натрия (SOS);
- раствор А. состоящий из водного раствора 1 %-ного BCA-Nar 2 %-ного моногидрата карбоната натрия.
0.16 %-ного тартрата натрия. 0.4 %-ной гидроокиси натрия и 0.95 %-ного водородного карбоната натрия":
- раствор А. состоящий из 4 %-ного пенталгидрата сульфата меди а деионизированной воде;
- пробирки:
- подставку для пробирок:
- защитные перчатки, свободные от протеина;
- тампоны и/или пластиковый мешок, которые не загрязнены протеином:
" Подходящие химикаты доступны для приобретения у фирмы Merck and Aldrich. Эта информация дается
для удобства пользователей настоящего стандарта и не служит одобрением этих продуктов со стороны ISO. Могут
быть использованы эквивалентные продукты, если они могут показать такие же результаты.
50