ГОСТ ISO 15883-1—2011
Приложение С
(обязательное)
Методы испытаний для обнаружения и оценки остаточного
протоиназного загрязнения
С.1 Нингидринный метод обнаружения остаточного лротеиназного загрязнения
С-1.1 Общие положения
Большая часть загрязнения, которое возникает на медицинских устройствах многократного пользования, яв
ляется в целом или частично протеиназным по характеру. Изпоженный метод обеспечивает тест до отказа с высо ким
уровнем чувствительности на протеины и аминокислоты. Для справки см. [19] и (34}.
П р и м е ч а н и е — Чувствительность испытания является достаточной, чтобы обнаруживать глицин в кон
центрации
2
мг/м*.
С.1.2 Оборудование и материалы
Оборудование и материалы должны включать в себя.
- ватные тампоны (пластиковые ручки);
- 2 %-ный нингидрин в 70 %-ном изопропаноле.
- дистиллированную воду;
- духовку (110 ’’С).
С.1.3 Процедура
Намочите тампон стерильной дистиллированной водой и используйте его для протирки поверхностей испы
туемых инструментов. Обеспечьте, чтобы протертый участок был не меньше пяти и не больше 50 см*.
После протирки инструмента осмотрите тампон.
Л
юбое изменение цвета показывает, что инструмент не был
чистым, поэтому нет необходимости продолжать протирку дальше.
Капните одну каплю (приблизительно 0.05 см3) реактива нингидрина на тампон и дайте ему возможность вы
сыхать на воздухе приблизительно 5 мин. Если появляется розовая окраска, то обнаружены остаточные проте-
ин/аминокислоты и дальнейшие действия не требуются.
Если окраска не появилась, перенесите тампон в духовку, нагревайте при температуре 100 °С—110 °С
30 мин и снова осмотрите тампон на розовую окраску.
Проведите позитивный и негативный контроль для каждой серии выполненных тестов.
С.1.4 Приемочные критерии
При испытании в соответствии с С.1.3 не должно быть;
- никакого изменения цвета тампона до применения нингидринного реактива.
- видимого розового обесцвечивания тампона после применения нингидринного реактива.
С.1.5 Аспекты безопасности
Должна применяться информация, предоставляемая производителем химикатов, например а справочном
листе по безопасности, а также необходимо носить средства индивидуальной защиты.
С.2 Метод ОРА для оценки остаточного белкового загрязнения
С.2.1 Общие положения
Метод орто-фталиевого диальдегида (ОРА) является количественным методом для определения свободных
первичных аминогрупп протеинов. Орто-фталиевый диальдегид в присутствии
Л
/.А1-диметил-2-меркапто-этил-ам-
мониевого хлорида с«- ик- аминогруппой образует устойчивый люминесцентный алкилтио-
2
-алкилизоиндол. кото
рый обнаруживается спектрометрическим методом на длине волны 340 нм. Для справки см. [20] и (21).
С.2.2 Оборудование и материалы
Оборудование и материалы должны включать в себя:
- ультрафиолетовый/визуальный спектрометр (UV/VIS);
- кварцевую кюветку на
1
мл;
- колпачки для кюветок;
- додецилсульфат натрия (SDS).
- о-фталиевый диальдегид:
-
Л
/.М-диметил-
2
-меркапто-этил-аммониевый хлорид;
•
0.1
М двунатриевый тетраборатный буфер;
- метанол;
- полиэтиленовый мешок, полиэтиленовую, полипропиленовую или стеклянную трубку;
- химический стакан;
- шприц:
- силиконовый трубопровод.
49