ГОСТ ISO 10993-10—2011
спорных случаях лучше всего разрешаются повторным исследованием. Гистолатологические исследо
вания. как показано, не помогают в оценке результатов.
Чтобы гарантировать воспроизводимость и чувствительность испытательной процедуры, тесты
с известными контактными аллергенами, например меркаптовензотиазолом (mercaptobenzothiazole),
гексиломом коричным альдегидом (hexyl cinnamic aldehyde) и бензокаином (benzocaine), должны регу
лярно выполняться.
7.4 Метод максимального сенсибилизирующего воздействия
7.4.1 Цель исследования
Исследование проводят для определения потенциальной способности материала оказывать сен
сибилизирующее действие на кожу морских свинок.
7.4.2 Подготовка исслодуомого материала
Твердые вещества (включая порошки) или жидкость готовят к исследованиям в соответствии с
приложением А. Концентрация пробы должна быть максимально возможной, но не мешать интерпре
тации результатов (см. 7.4.4.2).
7.4.3 Экспериментальные животные и их содержание
Используют здоровых молодых половозрелых морских свинок-альбиносов одной линии, любого
пола, массой до начала эксперимента 300—500 г. В эксперименте не используют беременных самок
или животных после спаривания.
Акклиматизацию и содержание животных осуществляют в соответствии с ISO 10993-2.
Предварительные тесты должны быть выполнены на одном наборе животных, чтобы определить
оптимальные концентрации для исследования (см. 7.4.4.2).
Для исследования порошкообразных или жидких материалов используют не менее 10 животных
на каждый исследуемый образец, и не менее пяти животных составляют контрольную группу. Для про
ведения предварительных исследований используют дополнительное число животных.
При исследовании экстрактов также используют не менее 10 животных для каждого экстракта, и
не менее пяти морских свинок составляют контрольную группу для каждого раствора. Для проведения
предварительных исследований используют дополнительное число животных.
Если испытание на 10 опытных и пяти контрольных животных полностью отрицательное, малове
роятно. что дальнейшее испытание на 10 опытных и пяти контрольных животных даст положительные
результаты. Однако, если проявятся какие-нибудь сомнительные реакции, перепроверка должна быть
выполнена (см. 7.4.6). Если сомнительные реакции остаются, проводят новое исследование на мини
мум 20 опытных и 10 контрольных животных.
7.4.4 Проведение исследования
7.4.4.1 Подготовка
Шерсть на подопытных участках кожи тщательно выстригают до начала исследования.
Доза, вводимая внутрикожно в каждый исследуемый участок, составляет 0.1 мл.
Для аппликаций пропитывают испытуемой пробой фильтровальную бумагу или гигроскопичную
марлевую подушечку (4— 8 см2), которые прикладывают на выстриженные участки кожи и фиксируют
окклюзионной повязкой вокруг тела животного.
7.4.4.2 Предварительные исследования
Предварительные испытания предназначены, чтобы определить концентрацию испытуемой про
бы. которая будет использоваться в основном исследовании, см. 7.4.4.3.
Неразведеннью экстракты при использовании известных растворителей не нуждаются в предва
рительном испытании.
Должно быть рассмотрено возможное влияние введения полного адъюванта Фрейнда (FCA) в со
четании с испытуемым материалом во время основного теста и. таким образом, возможное искажение
результатов.
Согласно применению испытывают крайние разведения на трех животных.
Через 24 чснимают повязку и образцы и оценивают состояние опытных участков на наличие эри
темы и отека в соответствии с таблицей 4 (по классификации Magnusson и Kligman).
Для индукционной фазы в основном тесте выбирают самую высокую концентрацию, которая не
вызывает более чем очень слабую эритему, и не оказывает общего отрицательного воздействия на
животных.
13