ГОСТ ISO 10993-10—2011
f) обсуждение результатов.
7 Методы исследования гиперчувствительности замедленного типа
7.1 Выбор метода
Наиболее широко для исследования гилерчувствительности замедленного типа материалов при
меняют два метода: метод максимального сенсибилизирующего воздействия (GPMT) и метод закрытых
накожных аппликаций (Buehler).
Метод максимального сенсибилизирующего воздействия более чувствителен и является предпо
чтительным для простых веществ. Этот метод применим для исследования экстрактов. Однако значи
мость этого метода показана для простых химических веществ.
Недавнобыл утвержден в качестве международного метод оценки простыххимических веществ —
местная проба на лимфоузле мыши (LLNA) как альтернатива оценке на коже морских свинок [83].
Примечание — Перечень альтернативных методов приведен в приложении С.
7.2 Выбор концентрации испытуемого образца
7.2.1 Общие сведения
Данные методы для исследования потенциального сенсибилизирующего действия простых хими
ческих веществ рекомендованы только для одного значения концентрации на каждое исследование.
Однако результаты исследования сильно зависят от дозы введенного вещества. Если метод использу
ется для оценки сенсибилизирующего действия экстракта, рекомендуется проведение количественного и
качественного анализа его состава.
7.2.2 Индукционная фаза
Скорость сенсибилизации в большой степени зависит от индукционной дозы, которая должна вы
зывать умеренное раздражение кожи. Если порог раздражения кожи не достигнут, то выбирают более
высокую концентрацию, но которая не должна сказываться на здоровье животного. Индукционную дозу
выбирают на основе предварительных экспериментов. Неразбавленные экстракты на основе извест
ных растворов для парентерального введения не нуждаются в предварительных исследованиях.
7.2.3 Провокационная фаза
Концентрацию провокационной пробы также определяют в ходе предварительных экспериментов
на животных, ранее не подвергавшихся воздействию исследуемого материала. Концентрация провока
ционной пробы должна быть ниже порога концентрации, вызывающей раздражение кожи. Рекоменду
ется использовать более чем одну концентрацию для провокационной пробы для того, чтобы сделать
более легкой оценку результатов (см. С.2 приложения С).
7.3 Прочие факторы, влияющие на полученные результаты исследований
При выборе метода учитывают биохимические и физические характеристики исследуемого мате
риала. Метод максимального воздействия требует внутрикожного введения, следовательно, если ис
следуемый материал нельзя ввести внутрикожно, необходимо использовать альтернативный метод.
Выбранный растворительдолжен повышать чувствительность метода благодаря частичному рас
творению материала и проникновению в более глубоко лежащие слои кожи. Концентрация исследу
емого материала должна быть максимально возможной, но не оказывать влияния на интерпретацию
результатов. Важным фактором при местном воздействии является концентрация материала на по
верхности кожи, а не его объем. Большинство исследователей предпочитает растворы, потому что дис
персии склонны к образованию осадка, что затрудняет точное дозирование. Примерами носителей для
внутрикожной инъекции служат солевой раствор, пропиленгликоль и растительное масло.
Расхождение в результатах, полученных разными лабораториями, возможно по нескольким при
чинам. В процедуре испытаний важно следующее: окружающие условия, место испытания на живот
ном, метод удаления волос или химической депиляции, тип пластыря, объем исследуемого материала,
качество окклюзии, время экспозиции и осмотра животных. Реактивность животных также изменяется в
зависимости от генетических факторов и сезонных колебаний.
Сравнение подопытных животных с положительной реакцией с животными контрольных групп
дает возможность адекватно выявить положительную реакцию, при этом тяжесть возникших патоло
гических изменений также имеет значение для интерпретации результатов. Пограничные реакции в
12