ГОСТР ИСО 7218—2008
П р и м е р — П о д с ч е т д а л с л е д у ю щ и е р е з у л ь т а т ы :
• в п о с л е д н е м за с е я н н о м р а з в е д е н и и (1 0 ’*) 120 к о л о н и й .
10
Таким о б р а зо м .
«• =
1
120
4
*
1 200 000.
О кр у гл е н и е р е зу л ь т а т а п р о и з в о д я т
в
с о о т в е т с т в и и с 10.3.2.2, ч и с л о N м и к р о о р г а н и з м о в р а в н о
1 200 000 и л и 1,2
ч
106 на с м
3
и л и н а г п р о д у к т а .
10.3.2.6 Измерение неопределенности
См. ИСО 19036 в отношении количественныхопределений.
10.4 Подсчет колоний дрожжей и плесеней
10.4.1 Общие положения
Подсчет колоний дрожжей и плесеней обычно проводят либо методом разливки сред, который
позволяетоблегчить задачу, либо методом подсчета при поверхностном посеве, который обеспечивает
максимальноевоздействие на клеткисостороны атмосферногокислорода ипозволяетизбежатьтепло
вого воздействия от расплавленного агара. Предварительно разлитый по чашкам агар перед посевом
рекомендуется подсушить (см. ИСО 11133).
Некоторые дрожжи и плесени могут вызывать инфекционные заболевания или аллергические
реакциидажеу здоровыхлюдей. В связисэтим необходимо проявлятьособуюосторожность приработе с
ними. Оптимальным вариантом является хранение чашек в термостате, а не в открытом помещении.
Крышки с чашек рекомендуется снимать только в случае крайней необходимости, обычно только при
приготовлении предметных стекол для исследования под микроскопом. Перед переносом материала
прокаленные иглы необходимо остудить, чтобы избежать рассеивания конидий и других клеток. Рабо
чиестолы и термостаты следует регулярнодезинфицировать.
Чашки Петри следует инкубировать в перевернутом положении и не трогать, пока на чашках не
вырастет посевной материалдля подсчета колоний. Это связано с тем. что перемещение чашек может
приводить к освобождению конидий или спор плесени и последующему появлению колоний-спутников,
приводя к повышенному подсчету популяциидрожжей и плесени.
10.4.2 Подсчет колоний дрожжей и плесеней
Дляподсчета берутчашки, содержащиеот 10до 150 колоний. Если флора микроорганизмов состо
ит преимущественно из плесеней, выбирают чашки, в которых количество колоний ближе к нижней гра
нице интервала; если флора микроорганизмов состоит преимущественно из дрожжей, для подсчета
выбираютчашки, в которых количество колонийближе к верхней границе интервала.
Если идентичность колоний вызываетсомнения, исследуют влажные препараты или окрашенные
препараты клеток, не менее пяти колоний на образец, чтобы подтвердить, что бактерии отсутствуют.
10.5 Подсчетпри использовании жидких сред
10.5.1 Принцип
Пробы дляанализа высеваютвжидкуюсреду, предназначеннуюдля поддержки роста конкретного
микроорганизма или группы микроорганизмов и часто для подавления размножения прочих
микроорганизмов.
Чтобы определить, происходит ли рост искомых микроорганизмов, можно использовать различ
ные критерии, например визуальное обследование помутнения, выделение газа, изменение цвета,
последующее выделение микроорганизмов на селективной агаризованной среде. Состав питательной
среды и критериидля выявления различий положительного иотрицательного результата определены в
соответствующихстандартах.
Используяподобныйподход, каждыйобразец дляанализаможетбытьописантолько качественно,
значение, т. е. результат оценивается как положительный или отрицательный. Чтобы установить коли
чество присутствующих микроорганизмов, необходимо исследовать несколько проб образцов для ана
лиза ииспользоватьстатистическиеметодыдляопределениянаиболеевероятногочисла(HB4=MPN).
10.5.2 Посев
10.5.2.1 Общие положения
Если используют селективную питательную среду, добавление образца для анализа не должно
уменьшатьселективныхсвойствэтой среды (тем самым способствуя роступрочих микроорганизмов). В
большинствестандартовинформация о совместимости определенныхобразцов ижидкой среды описа
на в области их применения. Необходимо с осторожностью подходить к таким образцам, как специи,
какао, бульон и т. д., поскольку они могут содержать подавляющие рост микроорганизмов вещества, в
связисчемтребуютдобавления нейтрализующихвеществ, применения болеевысокихкоэффициентов
разведения, центрифугирования, фильтрования или иммуномагнитнойсепарациидля выделения иско
мых микроорганизмов изобразца, даже если этоспециально неоговорено в соответствующихстандар
тах. Несовместимость может также быть вызвана биологическим составом образца; сильно
34