ГОСТРИСО 7218—2008
Если требуется подсчет малого числа микроорганизмов, подсчет может быть улучшен какс точки
зрения чувствительности, так иточности посредством введения дополнительного этапа концентрации
образца для анализа. Концентрация при этом может быть достигнута центрифугированием или
фильтрацией на мембранныхфильтрах.
При использовании центрифугированияполученныйосадокповторнорастворяют в меньшем объ
еме растворителя ипродолжаютанализ.
Для каждой рассматриваемой комбинации (пищевой продукт плюс микроорганизм) (см. например
ссылку (23]) необходимо предварительно установить, является ли введение этапа концентрации необ
ходимыми правомерным. Следуетоценитьспособностькфильтрованиюсуспензиипищевогопродукта.
Необходимо также проверить выполнение этапа концентрации в отношении чувствительности,
селективности, линейности и воспроизводимости. Если уровень загрязнения неизвестен, параллельно
необходимо провести исследование стандартным методом (без фильтрации).
9.2.2.2 Иммуноразделение
Если в пробеприсутствуютмалые количества интересующих микроорганизмов, разделение икон
центрация микроорганизмов может быть достигнута с помощью иммуномагнитных шариков, покрытых
специфическимиантителами.
Шарики распределяют, вместе с захваченными интересующими микроорганизмами, непосре
дственно на конкретной плотной питательнойсреде в соответствии с конкретными нормативными стан
дартами. Следуетпроверить, чтоиммуномагнитныешарики, покрытые специфическими,
используемыми на этом этапе концентрации антителами, удовлетворяют требованиям, как показано
при оценочныхиспытаниях, опубликованным в международной научнойлитературе, касающейся, глав
ным образом, микробиологии пищевых продуктов. Эта проверка особенно важна, если этот метод не
был утвержден в соответствиис ИСО 16140.
10 Обработка результатов
10.1 Общие положения
При оценке микробиологической безопасности пищевых продуктов и кормов для животных часто
недостаточно только знать, какие микроорганизмы присутствуют в образце. В большинстве случаев
количественный аспект не менее важен, и это требует необходимости подсчета микроорганизмов. Под
счет можно выполнить различными способами: с помощью прямого определения (микроскопия), посе
вом на плотные или жидкие питательные среды, с помощью проточной цитометрии, в полимеразной
цепной реакции в режиме реального времени и т. д. Однако в настоящем стандарте рассматривается
только подсчетмикроорганизмов на плотных ижидких питательныхсредах.
Подсчет на плотных питательныхсредахоснован на способности многих микроорганизмов проду
цировать колонии на агаровыхпитательных средах, которые можно распознать невооруженным глазом
или с помощью простого увеличительного стекла. Однако, если матрица содержит много частиц, кото
рые могут повлиять на обнаружение колоний, или если количество бактерий очень мало, этот принцип
невозможно использовать без первого отделения искомых микроорганизмов из матрицы (например
фильтрациейили иммуноразделением). Втакихслучаяхподсчете использованиемжидкихпитательных
сред являетсячасто оптимальной альтернативой.
10.2 Подсчет при использовании плотных питательных сред
10.2.1 Общие положения
Чашка Петридолжнабытьмаркированаэтикеткой, на которойуказываютномеробразца, разведе
ние. дату посева идругую необходимую информацию.
Необходимо выбрать определенные разведения, чтобы обеспечить получение определенного
количества колоний на чашках (см. 10.3.1) и преодолетьвозможные ингибирующие свойства.
Для переноса каждогоразведенияиспользуютотдельнуюстерильнуюпипетку, кромеслучаев, ког
да работу ведут от самого высокогоразведения к самым низким разведениям.
10.2.2 Количество чашок Петри на каждое разведение
В микробиологиипищевыхпродуктовобычноиспользуютоднучашкуна каждоеразведениемикро
организмов, согласно требованиям ИС017025.
В других случаях следует использовать две чашки для каждого разведения в соответствии с
ИСО 8199.
10.2.3 Методы разливки чашек
10.2.3.1 Общие положения
Отбирают определенные объемы разведений для исследования, касаясь наконечником пипетки
боковой стенки пробирки, чтобы удалить избыточную жидкость свнешней стороны пипетки. Поднимают
27