ГОСТР ИСО 7218—2008
крышку стерильной чашки Петри так. чтобы было возможно внести содержимое пипетки в чашку. Рас
плавленную агаровуюсреду выливаютпри температуре44 ’С—47 °С в каждую чашкуПетри. Необходи
мо наливать расплавленную среду таким образом, чтобы избежать ее попадания непосредственно в
инокулят (посевной материал). Расплавленную среду и инокулят немедленно тщательно перемешива
ют для получения равномерного распределения микроорганизмов в питательной среде. Далее чашки
помещают на горизонтальную поверхность, чтобы дать время охладиться и затвердеть питательной
среде (время затвердевания агара недолжно превышать 10 мин).
После расплавленияагаровойсреды, доведеннойдо необходимогосостояния, флакон изводяной
бани высушивают сухим чистым полотенцем, чтобы предотвратить загрязнение чашек водой бани.
Необходимоследить, чтобы среда не попадала навнешнюю сторонуфлакона или на внутреннюю часть
крышкичашки Петри во время разливки в чашки.
Для этого флакон или колбу необходимодержать фактически в горизонтальном положении и воз
держаться от возврата флакона в вертикальное положение между этапами разливки питательной
среды.
Если в исследуемом продукте предполагается присутствие колоний (например виды Proteus) с
«ползучим» ростом, используют для анализа слой со стерильным «голодным» агаром или идентичной
питательнойсредой, наносимые назатвердевшийагар вчашкиспосеянным материалом, чтобы предот
вратить или свести к минимуму распространение такого «ползучего» роста.
10.2.4Поверхностный посев
10.2.4.1 Общие положения
Методы посева, предназначенныедля получениятолько поверхностныхколонийнаагаровыхчаш
ках. имеют некоторые преимущества по сравнению с методом разливки в чашкидля выращивания мик
роорганизмов внутри агара.
Микроорганизмы не подвергаются действию высокой температуры расплавленной агаровой сре
ды. поэтому количество колоний может быть выше, а подсчетболее точным.
Используютпредварительно заполненные агаровой средой чашки, толщина агарового слоя кото
рых составляет не менее 3 мм. Слой агара должен быть ровным и не содержать пузырьков воздуха и
поверхностной влаги.
Чтобы облегчить равномерное распределение, поверхность затвердевшего агара необходимо
подсушить в соответствии с ИС011133 или. как определенодругим соответствующим международным
стандартом. В таком случае посевной материал абсорбируется в течение 15 мин.
10.2.4.2 Метод посева с помощью шпателя
С помощью стерильной пипетки проба жидкого образца (обычно от0.1 см3до 0.5 см3) для испыта
ния или исходной суспензии в случаедругих образцов переносят на агаровую средув чашки Петри (диа
метром 90 мм или 140 мм. соответственно). Этот шаг повторяют для следующего десятичного
разведения (колонии, подлежащие подсчету, тогда будут представлены в степени разбавления 10-1в
случае материалажидкой пробы и 10*2 в случае материала другой пробы) и. при необходимости, повто
ряютдальнейшие десятичные разведения.
Если необходимо подсчитать незначительное количество микроорганизмов в случае определен
ныхпродуктов, пределобнаруженияможноувеличитьв десятьразпосредством анализа 1,0см3пробы в
случае жидких продуктов и 1.0см3исходнойсуспензии вслучаедругих продуктов. Дляэтойцели. 1.0 см3
посевного материала распределяют или по поверхности большой чашки Петри (диаметром 140 мм) или по
поверхностям трех обычныхчашек Петри (диаметром 90 мм).
Спомощьюшпателя, изготовленногоизстекла, пластмассы илистали(напримеризготовленнойиз
стеклапалочки, изогнутой вформехоккейнойклюшкидиаметром приблизительно3.5 мм идлиной20см,
изгибы выполнены под прямымуглом на расстоянии 3смотодного конца палочки исплющены на концах с
помощью нагревания), распределяют посевной материал, по возможности, быстро и равномерно по
поверхности агара, не касаясь боковых стенок чашки Петри. Закрыв чашку крышкой, дают посевному
материалуабсорбироваться в течение 15мин при комнатной температуре.
В определенных случаях (как указано в соответствующем международном стандарте) посевной
материал можно поместить на мембрану и потом распределить по среде, как описано выше.
10.2.4.3 Методспирального нанесения материала
10.2.4.3.1 Общие положения
Метод спирального нанесения посевного материаладля определения уровня содержания микро
организмов проверен в межлабораторных испытаниях молока и молочныхпродуктов и других пищевых
продуктов.
Используемоеоборудование — спиральный дозатор — описан в 5.24.
28