ГОСТРИСО 7218—2008
10.2.4.3.2 Приготовлениечашекс агаровой средой
Для приготовления чашек с агаровой средой рекомендуется использовать автоматический доза
тор со стерильной системой дозирования, чтобы получить чашки с одинаковым объемом агаровой
среды.
Вовсечашкиналиваютодинаковое количествоагара таким образом.чтобы поддозирующей иглой
спирального дозатора высота слоя агара была одинаковой во всех чашках, и чтобы угол контакта оста
вался правильным и одинаковым.
Альтернативно можно использовать готовые агаровые чашки, имеющиеся в продаже.
10.2.4.3.3 Процедура нанесения посевного материала и подсчет
Обеззараживают кончик дозирующей иглы и трубку, обмакнув их в растворе гипохлорита натрия
(см. 5.24.4). а затем в стерильную водучерез систему, передтем как втянуть вдозирующую иглужидкий
образец.
Помещаютпредварительноразлитую агаровуюсредувчашкеПетри на поворачивающийсястолик
иопускаютдозирующую иглу. Проба распределяется посредепомередвижения кончика иглы по повер
хностиагаровойсреды. Засеянную чашкуубирают, а дозирующую иглувозвращаютв исходноеположе
ние. Иглуобеззараживают изагружаютдля посева в другие чашки.
Послетермостатирования наповерхностьзасеяннойагаровойсреды помещаютспециальнуюсет-
кудля подсчета количества микроорганизмов в чашках, засеянных по спирали. Для определения коли
чества микроорганизмов используют «правило двадцати». Подсчет колоний начинают, выбрав клин и
начав подсчет от наружного края первого сегмента по направлению к центру, пока не подсчитают 20
колоний. Процедурузавершаютподсчетом всегменте, содержащемдвадцатую колонию. На противо
положнойсторонечашкиподсчитываютсоответствующийучастокиделятчисло колоний, подсчитанных
пообестороны, наобъем образца, нанесенный надваданныхучастка. Объемы образца, соответствую
щие каждой части счетной сетки, приведены в инструкциях, которые прилагаются к каждому
спиральномудозатору.
10.2.5 Тормостатированио
Если в соответствующих стандартах нет специальных оговорок, чашки после посева незамедли
тельнопереворачиваютибыстро помещаютвтермостатсустановленной соответствующейтемперату
рой. Если происходит интенсивное обезвоживание (например при 55 °С или в случае интенсивной
циркуляции воздуха), чашки перед термостатированием неплотно укладывают в пластиковые пакеты
или используютсходную систему равной эффективности.
Во время термостатирования неизбежно происходят незначительные колебания температуры,
например во время загрузки и разгрузки термостата, и желательно, чтобы такие периоды занимали
минимальное время. Продолжительностьтакихопераций рекомендуетсяотслеживать, чтобы недопус
тить их заметного влияния нарезультат.
П р и м е ч а н и е — В определенных случаях, чтобы не спутать частицы исследуемого продукта с колония
ми микроорганизмов, полезно будет приготовить дубликаты засеянных чашек, которые хранят при температуре
(3 з 2) "С. для последующего сопоставления при подсчете с инкубированными засеянными чашками. Можно
также использовать бинокулярное увеличительное стекло, чтобы отличить частицы продукта и колонии
микроорганизмов.
В определенных обстоятельствах желательно поместить засеянные чашки в холодильник не
более чем на 24 ч передтермостатированием. Если это используется, лаборатория должна гарантиро
вать. чтоподобная практика не влияет на результат подсчета.
Обычно чашки Петри составляютдругнадруга, не болеешестиштук встопке при аэробной инкуба
ции. Стопкиследуетставитьдругот друга иотстеноктермостатанарасстояниинеменее25 мм. Однаков
термостатах, оснащенных системой циркуляции воздуха, высота стопокможетбытьбольше, арасстоя
ние между ними меньше; однако в этом случае необходимо проверять равномерность распределения
температуры в термостате.
После термостатирования чашки следует немедленно исследовать. Однако их можно хранить,
если нет иных указанийв соответствующихстандартах, до48ч вхолодильнике. Хранение в холодильни
кевтечениеболеедлительныхпериодовдопускается тольковслучаях, еслипоказано, чтоононе влияет
на количество искомых микроорганизмов, внешний вид или последующую идентификацию колоний.
Охлажденные чашки с некоторыми средами, содержащими индикаторные красители, рекомендуется
привести в равновесие с условиями окружающей среды при комнатной температуре перед
исследованием, чтобы обеспечить восстановление правильной окраски.
10.3Обработка результатов, полученных на плотных средах
10.3.1 Подсчет колоний
29