ГОСТ Р 70152—2022
Внести вокна предметного стекла (слайда) 50—100 мкл моющего буфера SureRinse™ (8), подождать 1мин.
Осторожно наклонить предметное стекло (слайд) (узким краем вниз) ис помощью фильтровальной бумаги удалить
моющий буфер, не касаться при этом поверхности окна предметного стекла (слайда).
Примечание — Чтобы снизить неспецифическую флюоресценцию и выделить контрастный фон для
лучшего наблюдения зеленой флюоресценции цист и ооцист, используется следующая процедура: нанести по од
ной капле контрастирующего красителя (11) в каждую лунку, инкубировать 1мин при комнатной температуре. Вне сти
в окна предметное стекла (слайда) 50—100 мкл моющего буфера SureRinse™ (8), подождать 1мин. Осторожно
наклонить предметное стекло (слайд) (узким краем вниз) и с помощью фильтровальной бумаги удалить моющий
буфер, не касаться при этом поверхности окна предметного стекла (слайда).
Разложить препараты на наклонном штативе для предметных стекол (слайдов), подсушить в токе теплого
воздуха.
Нанести 1каплю защитной среды (12) No-Fade™ в каждую лунку. Нанести покровное стекло.
Примечание — Меченые препараты должны храниться в темноте при температуре (5 ± 3) °С. Не до
пускать замораживания. Меченые препараты, защищенные средой No-Fade™, могут храниться при температуре (5
± 3) °С втечение по крайней мере 6 месяцев.
Б.1.10 Люминесцентная микроскопия
Исследуют препараты не менее чем при 100-кратном общем увеличении на наличие яблочно-зеленой флю
оресценции, микроскопируя все поля зрения лунки предметного стекла (слайда). При использовании каждой новой
партии реагентов и перед началом микроскопии препаратов исследуемых проб следует предварительно просмо
треть препарат положительного контроля, для чего используется контрольная суспензия с точно подсчитанными
цистами лямблий иооцистами криптоспоридий, прилагаемая в диагностическом наборе.
Результат:
- цисты лямблий — светящиеся и флюоресцирующие яблочно-зеленым светом объекты, от овальных до
сферических (от 10 до 18 мкм в диаметре), с ярко подсвеченными краями;
- ооцисты криптоспоридий—сверкающие и флюоресцирующие яблочно-зеленым светомобъекты, отоваль
ных до сферических (от 2,5 до 6 мкм в диаметре), с ярко подсвеченными краями.
Б.2 Санитарно-паразитологическое исследование пыли и воздуха в помещениях
для осуществления внутрилабораторного контроля
Б.2.1 Отбор проб и подготовка к исследованию
Для сбора пыли используют камеру, представляющую собой металлический цилиндр длиной 110—120 мм с
внутренним диаметром 27 мм [по ширине стандартного предметного стекла (слайда)]. Встенке цилиндра имеется
всасывающее отверстие размером 2 * 25 мм. Внутри цилиндра укреплены 2 стержня, фиксирующие предмет ное
стекло (слайд) в диаметральной плоскости и продольном направлении. С одного конца цилиндр закрывают
съемной крышкой, а открытым концом присоединяют к патрубку пылесоса или другого всасывающего устройства
(аспиратор, воздуходувка ит.п.).
На одну сторону чистого предметного стекла (слайда) наносят тонкий слой 50 %-ного раствора глицерина в
виде полоски шириной 1,5—2,0 см и длиной 4—5 см. Предметное стекло (слайд) вставляют в камеру так, чтобы
смазанная глицерином поверхностьбыла обращена к всасывающему отверстию камеры. Камерузакрывают крыш
кой. Затем включают пылесос или другое всасывающее устройство и производят отбор пыли.
При отборе проб всасывающее отверстие камеры должно быть обращено к исследуемой поверхности и
находиться на расстоянии 2—3 мм. Перемещать всасывающее устройство во время работы над поверхностью
следует равномерно. На одну пробу собирают пыль с площади не менее 0,25 м2в течение 20 с, воздуха — 60 с.
После отбора пробы пылесос или другое всасывающее устройство выключают, открывают камеру и извлекают
предметное стекло (слайд). На смазанной стороне предметного стекла (слайда) будет отчетливо виден пылевой
след, представляющий собой готовый препарат, который микроскопируют (при увеличении *56—80). Если препа
рат получился плотным, его просветляют 1—2 каплями воды или 50%-ного раствора глицерина. Под микроскопом
среди пылевых частиц хорошо видны яйца гельминтов. Микроскопирование препаратов может производиться на
обследуемом объекте сразу после отбора проб или в лаборатории.
Сбор проб пыли и воздуха непосредственно на предметное стекло (слайд), покрытое клейкой смазкой, ис
ключает использование фильтров, центрифугирование, приготовление мазков и другие действия, во время кото
рых могут быть потери яиц гельминтов или нарушение их целостности. Кроме того, использование клейких пред
метных стекол (слайдов) ускоряет время отбора проб и позволяет, что особенно важно при обследовании детских
учреждений, просматривать предметные стекла на местах обследования. Последнее дает возможность на местах
составлять план мероприятий по предупреждению загрязнения идегельминтизации внешней среды.
Б.2.2 Исследование пыли и воздуха на яйца гельминтов. Метод Каледина и Романенко (1982)
Для отбора и исследования проб пыли используют липкую прозрачную целлофановую ленту (скотч) со сло
ем клея до 3 мм.
47