ГОСТ Р 70152—2022
Сухие питательные среды с истекшим сроком годности, но с не изменившимся цветом и конси
стенцией, подвергают количественным методам контроля питательных сред по биологическим показа
телям с целью принятия решения о продлении срока годности.
Все приготовленные среды следует промаркировать с указанием названия среды, а также даты
приготовления и срока годности. Дату приготовления питательной среды заносят в журнал.
Параметры микроклимата в местах хранения питательных сред проверяют ежедневно и результа
ты проверки заносят в журнал (формуляр) и заверяют подписью исполнителя.
11.3 Контроль питательных сред на этапе приготовления
Для приготовления питательных сред и растворов, используемых в микробиологическом анализе,
допускается применение химических веществ по степени чистоты не ниже ЧДА. Требования к каче
ству воды для приготовления питательных сред для микробиологических анализов изложены в ГОСТ Р
58144.
При условии, что приобретена продукция надлежащего качества, одним из основных факторов,
определяющих качество и дальнейшую пригодность питательной среды, является правильность ее
приготовления.
Приготовление сред должно осуществляться со строгим соблюдением рецептуры приготовления
и условий стерилизации, определенных изготовителем.
Контроль питательных сред на этапе приготовления включает:
- оценку внешнего вида готовой среды;
- измерение pH готовой среды;
- определение стерильности (отсутствия контаминации) готовой среды;
- постановку качественного контроля биологических свойств среды (раздел 11).
Контроль питательных сред на этапе приготовления проводят при каждом приготовлении среды.
11.3.1 Оценка внешнего вида готовой среды (визуальный контроль)
Оценку внешнего вида питательной среды проводят визуально по ниже приведенным параме
трам.
Цвет, прозрачность и консистенция сухой и приготовленной среды должны быть типичны для дан
ного продукта и соответствовать описанию изготовителя. Несоответствие заявленным в паспорте пара
метрам среды свидетельствует о ее непригодности.
Некоторыми очевидными ошибками при приготовлении сред являются:
- потемнение среды вследствие перегревания и недостаточного перемешивания;
- неполное растворение порошкообразной среды;
- образование осадка.
В агаризованных средах осадок может образовываться вследствие продолжительной стерили
зации, повторных плавлений твердого агара или длительного содержания расплавленного агара при
высокой температуре. В этих случаях появление осадка свидетельствует о непригодности питательной
среды.
Кроме того, агаризованные среды могут образовывать хлопьевидный осадок, если расплавлен
ная среда остается в водяной бане при температуре от 43 до 45 °С более 30 мин, вследствие начи
нающегося процесса застывания агара. Такой хлопьевидный осадок агара можно рассеять путем по
вторного нагревания среды до 60 °С. Если осадок не рассеялся, это свидетельствует о непригодности
питательной среды.
11.3.2 Измерение pH
Значение водородного показателя определяют с помощью pH-метра по 5.10. Возможно исполь
зование бумажной индикаторной системы с шагом измеряемого диапазона не более 0,3 единиц при
промежуточных измерениях в ходе приготовления питательной среды.
В готовых жидких средах и гидролизатах определение pH проводят непосредственно в растворе.
В готовых плотных агаровых средах pH определяют после их охлаждения до 45—50 °С. При этом
необходимо особо тщательно отмывать электрод после измерения pH в агаризованных средах теплой
дистиллированной водой.
11.3.3 Определение стерильности
Определение стерильности (для стерилизуемых сред) и отсутствия контаминации (для нестери-
лизуемых сред) проводят путем инкубации чашки или пробирки с исследуемой средой в термостате,
при температуре и в течение времени, определенных для этих сред методическими документами по
исследованию воды.
23