ГОСТ Р 70152—2022
По истечении срока инкубации на (в) исследуемых питательных средах должны отсутствовать
визуально определяемые признаки роста микроорганизмов. Результаты регистрируют в журнале.
11.4 Контроль биологических свойств питательных сред
Оценка биологических (ростовых) свойств питательных сред проводится по следующим показа
телям.
Чувствительность — максимальное разведение тестовой культуры, при котором на всех засеян
ных чашках (во всех пробирках) обнаруживается рост.
Скорость роста — минимальное время инкубации после посева культур, достаточное для визу
ального выявления роста (выражается в часах).
Дифференцирующие свойства — оцениваются по выраженности основных отличительных при
знаков, характеризующих рост тестовых штаммов на данной питательной среде.
Кроме того, для дифференциальных сред необходимо определять ингибирующее действие сре
ды. Ингибирующее действие среды определяется как в отношении основного тестового микроорганиз
ма, так и по отношению к сопутствующим микроорганизмам.
Оценка ингибирующих свойств не проводится для жидких и полужидких сред (например, для по
лужидких сред Гисса, лактозо-пептонной среды, глюкозопептонной среды).
Оценка ингибирующих свойств проводится по двум показателям:
- процент извлекаемости — процентное соотношение среднего значения количества колоний, вы
росших на исследуемой среде, к среднему значению количества колоний, выросших на контрольной
среде;
- показатель ингибиции — степень подавляющего воздействия на постороннюю микрофлору, вы
ражается минимальным разведением, при котором полностью отсутствует рост посторонней флоры.
Основным тестовым микроорганизмом для оценки биологических свойств среды, используемых
для текущего санитарно-бактериологического контроля воды, является Е. coli.
Дополнительно используются следующие тест-штаммы:
- для выявления дифференцирующих свойств среды — Salmonella typhimurium (на среде Эндо
круглые, бледно-розовые колонии) или Shigella sonnei «S-form» (на среде Эндо круглые, прозрачные,
бледно-розовые) в качестве вида, не ферментирующего лактозу; Enterococcus faecalis; Pseudomonas
aeruginosa или Pseudomonas fluorescens; Staphylococcus aureus; Aspergillus brasiliensis; Candida albicans;
- при определении показателя ингибиции посторонней микрофлоры, например на среде Эндо —
Staphylococcus aureus.
Контроль биологических свойств готовых питательных сред включает два этапа: качественный и
количественный контроль, каждый из которых имеет свое целевое предназначение.
Задачей качественного контроля является выявление грубых нарушений технологии приготовле
ния, приводящих к выраженному снижению ростовых и/или дифференцирующих свойств. Качествен
ный контроль проводят после каждой варки среды.
Количественный контроль позволяет выявлять относительные изменения (ухудшение) ростовых
свойств из-за ряда причин, возникающих на этапах транспортирования, хранения, приготовления, сте
рилизации, а также при изменении технологических требований в процессе производства питательных
сред, в результате которых они оказываются менее эффективными.
Количественный контроль выполняется:
- при поступлении каждой новой партии среды;
- при необходимости решения вопроса о продлении срока годности среды либо возможности ее
дальнейшего использования в случае выявления нарушений условий хранения.
Учитывая, что разные серии питательных сред одного производителя иногда имеют различие по
качеству, контролю подлежит каждая серия среды поступившей партии.
Количественный контроль также может служить инструментом выбора более эффективной среды
серии продукции, предлагаемой на современном рынке.
11.4.1 Качественный контроль
В процессе качественного контроля оценивают принципиальную способность основного тестово
го штамма расти на данной среде, а также наличие характерных дифференцирующих признаков для
специфических сред.
Качественный контроль выполняется лабораторией после каждой варки питательной среды.
11.4.1.1 Методика исследования
Накануне исследования тестовую культуру готовят, как указано в 13.3.4.
24