ГОСТ Р 70152—2022
высить общую емкость цилиндра. Всплывшие на поверхность жидкости кусочки бумаги, ткани и другие крупные
частицы удаляют петлей с сеткой, аоставшуюся жидкость отстаивают в течение 12—16ч, надосадочную жидкость
удаляют, а осадок микроскопируют, окрашивая 1%-ным раствором Люголя.
Б.1.3.2 Метод иммуномагнитного разделения и мечение флуоресцирующими антителами (ИМС) на опреде
ление цист иооцист кишечных простейших.
Б.1.4 Материал, оборудование и реактивы
Магнитный штатив.
Автоматические пипетки на 1—10 мкл, 20—200 мкл и 100—1000 мкл.
Наконечники для автоматических пипеток.
Градуированная пипетка на 10 см3.
Лабораторный вортекс.
Лабораторный ротатор.
Пробирки для иммуномагнитной сепарации (ИМС-пробирки или плоскостенные пробирки) или обычные цен
трифужные.
Штатив для ИМС-пробирок.
Пробирки типа Эппендорф на 1,5 см3.
Штатив для пробирок типа Эппендорф.
Флуоресцентный микроскоп с набором необходимых фильтров и принадлежностей в рекомендованной ком
плектации или насадка на микроскоп ОптиЛюм.
Стекла предметные SuperStick™: S100-2 (два окна), или обычные предметные стекла.
Пастеровские пипетки.
Буфер для иммуномагнитной сепарации Grab™ Buffer А (1), 2-концентрированный.
Иммуномагнитная суспензия Giardia-Grab™ IMS Beads (2), специфичная к цистам лямблий.
Иммуномагнитная суспензия Crypto-Grab™ IMS Beads (3), специфичная к ооцистам криптоспоридий.
Моющий буфер Grab™ Buffer В (4).
Таблетированный фосфатный буфер PBS (6).
DAPI концентрированный раствор (7), 2 мг/см3.
DAPI в метаноле.
Моющий буфер SureRinse™ (8).
ИммунореагентAqua-Glo™G/C (9) в рабочем разведении.
Положительный контроль (10).
Контрастирующий краситель (11), С101.
Защитная среда (12) No-Fade™, М101 или E1-vanol No-Fade™, М102.
Метанол.
0,1 Н раствор соляной кислоты.
1Нраствор NaOH.
Примечание —Допускается использование материалов, оборудования и реактивов иных производите
лей с аналогичными характеристиками, но не ниже указанных.
Б.1.5 Подготовка проб (смывов) к исследованию
Подготовка проб (смывов) к исследованию после фильтрации смыва с рабочих поверхностей осадок с филь
тров (МФАС или АТМ) смывают в 10см3дистиллированной воды, переливают вцентрифужную пробирку ицентри
фугируют 10 мин при 1500 об/мин. Затем удаляют надосадочную жидкость и проводят исследование осадка. При
этом осадок должен быть не более 1см3. Если получился больший объем осадка, его необходимо ресуспендиро-
вать дистиллированной водой.
Водной ИМС-пробирке обрабатывается не более 0,5 см3концентрата пробы, ресуспендированного в 3 см3
дистиллированной воды. Больший объем осадка необходимо перемешать с дистиллированной водой, разделить
на части, в каждой из которых должно содержаться не более 0,5 см3исходного осадка, идалее обрабатывать как
две иболее пробы.
Примечание —Диагностические наборы с иммунореагентами ибуферными растворами перед исполь
зованием выдержать втечение одного часа при комнатной температуре.
Б.1.6 Иммунохимическое связывание, магнитная сепарация и промывка
С помощью градуированной пипетки на 10 см3,предварительно омытой дистиллированной водой, перенести
в пробирку для иммуномагнитной сепарации (ИМС-пробирку или плоскостенную пробирку) исследуемый концен
трат, ресуспендированный в3см3дистиллированной воды. Омыть пробирку, вкоторой находился концентрат,
дву мя порциями дистиллированной воды по 1см3,оба смыва перенести впробиркудля иммуномагнитной
сепарации. Общий объем раствора впробирке для ИМС составит 5см3.Внести впробиркудля ИМС 5 см3 2-
концентрирован-ного буфера Grab™ BufferА (1). Плотно закрыть крышку пробирки иперемешать раствор,
переворачивая пробирку 3 раза. По выполнении всех процедур переноса пробы общий объем раствора в ИМС-
пробирке составляет 10см3.
45