С. 42 ГОСТ 28178-89
20.2. Подготовка к испытанию
20.2.1. К у л ь т и в и р о в а н и еи н ф у з о р и й
Пересевают 0,2 см5среды с культурой на свежую триптонную или пептонную среду. Пересев
проводят каждые 7 дней. Раз в месяц проводят бактериологический контроль среды на стерильность
путем посева на мясо-пептонный агар.
20.2.2. П р и г о т о в л е н и еф о с ф а т н о г об у ф е р аpH 7,4
В мерную колбу вместимостью 200 см3 берут 81 см3 0.2 моль/дм3(0,2 и.) раствора фосфорно
кислого натрия двузамешенного и 19 см’ 0.1 моль/дм3фосфорнокислого натрия одпозамешенпого.
объем доводят дистиллированной водой до 200 см3.
20.2.3. Р а с ч е тм а с с ын а в е с к ип р о д у к т а
Массу навесок продукта (т) в граммах, соответствующую заданным количествам (концентра
циям) азота: 3, 6. 10. 15 и 20 мг вычисляют по формуле
< 1 7 >
где А - заданные количества (концентрации) азота в навеске продукта, мг;
100 — коэффициент пересчета содержания азота в 100 г продукта;
N — массовая доля азота в продукте, %.
20.3. Проведение испытания
Соответствующие навески переносят в конические колбы со средой УСД. Проверяют pH среды,
pH не должно резко меняться. Если pH снижается до 5 и ниже, среду готовят, используя вместо
дистиллированной воды фосфатный буфер pH 7,4. Затем засевают 0.2 см3инокулята 3—4-
суточной инфузории и полученные пробы инкубируют втермостате при температуре 24—26 "С
втечение 72 ч. Для лучшей аэрации колбы 2—3 раза в сутки встряхивают.
В качестве контроля за состоянием культуры используют казеин в заданных концентрациях
азота: 3, 6, 10, 15 и 20 мг.
20.4. Обработка результатов
Культуру инфузории в исследуемых пробах просматривают в капле на предметном стекле
(каплю берут стеклянной палочкой или пастеровской пипеткой) под микроскопом (объектив 10.
окуляр 7) в 5—6 полях зрения через 72 ч.
В случае гибели инфузории втечение учетного времени хотя бы в одной из концентраций или
наличия единичных (до 5) ктегок и поле зрения при одновременном снижении активности
тест-культуры в двух последних концентрациях и получение аналогичного результата в повторном
эксперименте с предварительным кипячением среды УСД с навесками в колбах в течение 10 мин
на водяной бане продукт считается токсичным. Если вопыте без кипячения токсичность выявлена, по
в повторном опыте с предварительным кипячением токсичность не обнаруживается, то следует
провести контроль токсичности исследуемой партии продукта на белых мышах в соответствии с
требованиями п. 21.
При большом количестве анализируемых проб допускается использовать микрометод при
10-кратном уменьшении питательной среды, навески и количества засеваемой культуры. Ятя
исследований используют флакончики из-под антибиотиков с резиновыми пробками,
имеющими боковой срез для доступа воздуха, или доски для постановки реакции
гемоагглютинации.
(Измененная редакция, Изм. № I).
21. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ НА БЕЛЫХ МЫШАХ
Метод применяют при разногласиях в оценке качества кормовых дрожжей.
21.1. Аппаратура, материалы и реактивы
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г или весы
3-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 1 кг по ГОСТ 24104.
Баня водяная.
Центрифуга лабораторная.
Гомогенизатор лабораторный.
Аппарат для встряхивания жидкости в сосудах (шутгель-аппарат).
Колбы вместимостью 100 см’ с притертой пробкой.
Стакан химический мерный вместимостью 50 см3.
Шприц вместимостью I или 2 см3 с тупыми иглами, слегка загнутыми, длиной 2,5—3.0 см3,
диаметром внутреннего отверстия не менее 1.5 мм.
Фильтры бумажные (белая лента).