ГОСТ 28178-89 С. 13
Номер полоскиКоличеств лтипл, мкг
1
10
220
325
435
5
50
Количество лизина на полосках фильтровальной
бумаги должно соответствовать указанному в таблице.
Для построения градуировочного графикадопус
кается использование и других количеств лизина.
Участок бумаги, занятый пробой, вырезают и
помещают в пробирки вместимостью 5 см5с пришли
фованными пробками. Затем в каждую пробирку до
бавляют пипеткой 1,2 см3 фурфурольного реактива,
60
пробирки плотно закрывают пробками, помещают в
водяную баню, предварительно нагретую до 95 *С, и
выдерживают при этой температуре в течение 40 мин. Затем пробирки вынимают из бани, быстро
охлаждают, опустив пробирки в баню с холодной водой или помещая их под струю воды из
водопровода. После охлаждения сразу в каждую пробирку пипеткой приливают по 2 см3 раствора
глицерина и содержимое пробирок тщательно перемешивают.
Далее раствор спектрофотометрнруют, измеряя поглощение света на длине волны 540 нм в
кюветах с длиной поглощающего слоя 5 мм. В кювету сравнения наливают раствор, приготовлен
ный, как раствор 6. но без помещения в пробирку фильтровальной бумаги.
Для каждого количества лизина готовят две параллельные пробы.
За окончательный результат величины оптической плотности каждого раствора лизина при
нимают среднюю арифметическую величину двух параллельных определений, значения которых не
должны отличаться от средней величины более чем на 5 %, рассчитанных до целого числа.
По полученным данным строят градуировочный график, откладывая по оси ординат показа
тели оплзческой плотности, а по оси абсцисс —содержание лизина в микрограммах.
8.3. Проведение испытания
В грушевидную колбу отвешивают 0,2—0,3 г продукта (результат записывают с точностью до
четвертого десятичного знака). Пипеткой прилипают 5 см3раствора соляной кислоты концентрации 6
моль/дм3 (6 и.). Колбу плотно закрывают пришлифованной пробкой и помещают в сушильный
шкаф, предварительно нагретый до температуры (П0±2) *С, и выдерживают при этой температуре
18 ч. Через 1 ч колбу вынимают, просматривают и, если в реакционной смеси заметны комочки, их
разбивают встряхиванием колбы и снова ставят в сушильный шкаф.
Через 18 ч колбу вынимают и охлаждают. Затем доводят pH раствора по универсальной
индикаторной бумаге до 4—5, добавляя необходимое количество раствора гидроокиси натрия кон
центрации 6 моль/дм3 (6 н.).
Гидролизат фильтруют через бумажный фильтр в мерную пробирку вместимостью 15 см3.
Реакционную колбу обмывают 4 см3дистиллированной воды (двумя порциями по 2 см3) большим
количеством дистиллированной воды (1—2 см3) и этой же водой промывают осадок на фильтре.
Раствор тщательно перемешивают и измеряют объем полученного раствора гидролизата.
Микрошприцем или автоматической пипеткой на полоску фильтровальной бумаги размером
5 х 0,5 см наносят 20 мкл полученного раствора гидролизата. Подоску высушивают в токе теплого
воздуха. Участок бумаги, занятый раствором гидролизата, вырезают, помещают в пробирки вмести
мостью 5 см3с пришлифованной пробкой и проводят определение по п. 8.2.8.
Содержание лизина в растворе гидролизата определяют по калибровочному графику.
Проводят два параллельных определения.
8.4. Обработка результатов
Массовую долю лизина (3f,) в процентах вычисляют по формуле
А ■V ■100
Хзж-20-(1-0,01 W) *
(7)
где А —количество лизина в растворе гидролизата, найденное по калибровочному графику, мкг;
V —объем полученного раствора гидролизата, см3;
т — масса навески продукта, г;
20 —объем раствора гидролизата, взятый на определение, мкл;
W — массовая доля влаги в продукте, %.
Результат округляют до второго десятичного знака. Из результатов двух параллельных опреде лений
вычисляют среднее арифметическое значение с тем же числом знаков после запятой и
определяют расхождение между каждым результатом и средним арифметическим значением. До
пускаемое относительное расхождение не должно превышать 10 %, округленных до целого числа.