С. 36 ГОСТ 28178-89
18. М Е Т О Д О П Р Е Д Е Л Е Н И Я О Б Щ Е Й Б А К Т Е РИ А Л Ь Н О Й О Б С Е М Е Н Е Н Н О С Т И
18.1. Аппаратура, растворы и реактивы
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по
ГОСТ 24104.
Прибор для счета колоний бактерий.
Термостат электрический с автоматическим терморегулятором.
Баня водяная.
pH-метр.
Электроплитка с регулятором температуры или электронагреватель.
Автоклав или стерилизатор.
Микроскоп световой биологический типов I. Ill по ТУ 3—3.404.
Шпатель металлический.
Пробирки вместимостью 25 или 50 см3 по ГОСТ 25336.
Чашки Петри по ГОСТ 25336.
Пипетки вместимостью 1см3по НТД; конец пипетки для анализа предварительно расширяют.
Колбы конические вместимостью 250, 500 и 750 см’ по ГОСТ 25336.
Стекла предметные по ГОСТ 9284.
Стекла покровные по ГОСТ 6672.
Агар микробиологический по ГОСТ 17206.
Агар питательный сухой или агар мясо-пептонный (готовят по ГОСТ 10444.1), или
агаризованная среда на основе ферментолизата микроорганизмов (готовят по п. 18.2.1 настояще го
стандарта).
Агар голодный; готовят по ГОСТ 10444.1.
Раствор физиологический pH 7,0; готовят по ГОСТ 10444.1.
Ферментолизат биомассы микроорганизмов осветленный.
Натрия гидроокись по ГОСТ 4328. раствор с массовой долей 20 %.
Натрий хлористый по ГОСТ 4233.
Вода дистиллированная.
(Измененная редакция, Изм. № 1).
18.2. Подготовка к испытанию
18.2.1.П р и г о т о в л е н и еа г а р и з о в а м н о йс р е д ынао с н о в еф е р
м е н т о л и з а т а б и о м а с с ым и к р о о р г а н и з м о в
Среду готовят исходя из содержания аминного азота в порошке ферментолизата. Необходимое
количество порошка разводят в 1 дм1 водопроводной воды до содержания аминного азота около
100 мг/100 см3; устанавливают pH среды 7,0—7,2 раствором гидроокиси натрия с массовой долей 20
%; к жидкому ферме
1
гтолизату добавляют 5 г хлористого натрия и нагревают на слабом огне при
постоянном помешивании до полного растворения ингредиентов.
Приготовленный бульон фильтруют через ватно-марлевый фильтр, устанавливают слабоще
лочную реакцию (pH 7,0—7.2) и добадляют 20 г агара. После добавления агара жидкость кипятят на
слабом огне при постоянном помешивании до полного растворения агара. Приготовленную среду
фильтруют через ватно-марлевый фильтр, разливают в колбы и стерилизуют в автоклаве при
температуре 120‘С в течение 20 мин.
18.3. Проведение испытания
В стерильную пробирку фламбированным шпателем берут навеску продукта массой I г.
Разведения для посевов готовят следующим образом: к навеске массой 1 г добавляют 9 см3
физиологического раствора pH 7,0 и тщательно перемешивают стерильной пипеткой до получения
однородной суспензии. Из первого разведения 1:10 готовят последующие разведения 1:100 и т. д.
Порядок разведения выбирают в зависимости от предполагаемой обсемененности продукта, с тем
чтобы на чашках развивалось 30—300 колоний бактерий. Для приготовления первого разведения
используют пипетку с расширенным концом.
Посев проводят из двух-трех (а в отдельных случаях более) последовательных 10-кратных
разведений. Каждое разведение высевают на 2—3 чашки Петри. По I см’ суспензии вносят в чашку с
заранее маркированным дном и заливают не позднее чем через 15 мин 12—15 см* расплавленного
иохлажденногодо температуры 45 *Смясо-петонного агара или одной из сред, указанных в п. 18.1.
Сразу после заливания среды содержимое чашки тщательно перемешивают путем вращательного
покачивания для равномерного распределения посевного материала.