ГОСТ Р ИСО 10993.10-99
лоскутных аппликаций, исключил у пациента диагноз контактной аллергии на ртуть. Это новаторское иссле
дование позволило подвести научную базу под методы диагностики, лечения и предупреждения контактной
аллергии у человека и животных. Дальнейшее развитие методы исследования и предупреждения сенсибилизи
рующего действия материалов и изделий из них получили в работах Landstcincr и Chase, которые предложили
использовать морских свинокдля изучения пшерчувствительности замедленного типа. В 1965 Buehlcr предло
жил закрывать аппликационные участки для обеспечения максимального контакта и приближения условий
эксперимента на животных к исследованиям на человеческом организме (повторение метода закрытых участ
ков на человеческом организме HRIPT). Было доказано, что использование метода закрытых участков аппли
кации обеспечивает достаточную чувствительность и предотвращает средние и тяжелые случаи сенсибилиза
ции, а также позволяет избежать экспериментальных исследовании на человеческом организме при проведе
нии
HRIPT.
Представленные результаты демонстрируют преимущества аппликаций перед внутрикожным вве
дением и методом открытых участков аппликации. Стимуляцию иммунной системы различными адьюватггами
при этом нс проводят. Этот метод официально признан достаточно чувствительным и относительно безопас
ным, позволяющим выявить лаже слабые аллергены.
Magnusson и Kigman опробовали различные варианты исследований на морских свинках и предложили
методику с использованием внутрикожного введения (с полным адыовантом Фрейнда или без него) и после
дующими накожными аппликациями исследуемого материала на тот же участок кожи. Предложена оригиналь
ная методика, требующая предварительной обработки экспериментальных участков, если исследуемый мате
риал нс обладает раздражающим действием. Эта методика достаточно чувствительна и широко используется.
Неординарный способ введении (внугрикожная инъекция) и использование полного адьванта Фрейнда позво
ляет исключить основные компоненты иммунной системы (клетки Лаигерганса), изменить структуру аллер
гена и вызвать экспериментальную толерантность.
Для Оценки безопасности материалов наиболее часто используют два метода исследований: закрытых
аппликаций в СШАи садъювантом Фрейнда в Европе. Методическими руководствами ОЭСР и ЕЭС эти методы
признаны предпочтительными. Внастоящее время предложен ряд других методов, обладающих определенны
ми преимуществами. Существует несколько современных технических приемов, позволяющих интенсифици
ровать процесс научных исследований. Экспериментаторы при этом используют унифицированную документа
цию. Во всех случаях использования других методов (таблица Д.1) в отчете об исследовании дают ссылку на
литсрагурный источник.
Т а б л и ц а Д.1 —Альтернативные методы изучения сенсибилизирующего действия
1 Метод с использованием полного алыованта Фрейнда
2 Метод с использованием адьюванга Сплита
3 Методоткрытых эиикутанных аппликаций
4 Оптимальный метод Мауера
5 Пищевой метод (на морских свинках)
6 Кумулятивный метод (с увеличением степени контакта)
7 Скарификаиионный метод (с адъювантом и аппликациями)
8 Метод исследования на ушах мыши
9 Исследование регионарных лимфоузлов
Пункт 9 в таблице Д.1 позволяет подсчитать увеличение (пролиферацию) лимфоиитов в лимфоузлах,
регионарных к месту воздействия. На практике растворенный в органическом растворителе исследуемый мате
риал несколько раз наносят на оба уха мышам с последующим внутривенным введением раствора метилти-
мидина вфосфатном буфере. Затем выделяют аурикулярные лимфоузлы, из одного лимфоузла готовят клеточ
ную суспензию в трихлоруксусной кислоте. нситрнфутируют. обрабатывают ецннтиллируюшей жидкостью
|‘Н| с мстилтримсдином и подсчитывают количество бетта-сцинцилляций. Сравнивают с контролем, прошед
шим такую же процедуру.
Исследовательский процесс нс должен быть ориентирован только на одну экспериментальную модель,
но его основная задача обеспечить максимальную безопасность потребителя. В качестве экспериментальной
модели можно использовать животных и человеческий организм. Уисследователей должна быть определенная
степень свободы в выборе экспериментальной модели при наличии соответствующей узаконенной документа
ции и научного обоснования.
В настоящее время Управление по охране окружающей среды США считает, что для регистрации н
маркировки изделия или материаладостаточно представить результаты исследований на восьми морских свин
ках. Рекомендуют проводить предварительные скрининговые исследования на морских свинкахдля новых ма
териалов. а также веществ с высокой активностью, которая обусловлена их химической структурой. Выбор
модели эксперимента на морских свинках зависит от имеющейся информации и опыта исследователя. Отрица
тельный ответ, полученный в экспериментах на морских свинках, может иметь определяющее значение при
условии, что доза или концентрация исследуемого вещества в эксперименте значительно превышает указан
ные параметры при применении в медицинской практике. Нс следует давать оценку исследуемою материала,
базируясь только на одном примере резко выраженного действия. Вкаждом конкретном случае всегда учиты
вают практическое использование материалов и изделий.
28