ГОСТ Р ИСО 10993.10-99
6.2.4 Проведение исследования
6.2.4.1 Подготовка
Шерсть на подопытных участках кожи тщательно выстригают за лень до начала исследования.
Доза, вводимая внутрикожно в каждый подопытный участок, равна 0.1 мл.
Для всех аппликаций используют кусочки фильтровальной бумаги, пропитанные исследуемым
материалом или вытяжкой из него, которые прикладывают на выстриженные участки кожи и фикси
руют бинтом вокруг тела животного.
6.2.4.2 Предварительные исследования
П р и м е ч а н и е —Предварительные исследования проводят для того, чтобы определить концентра
цию исследуемого материала, которая будет исполыонана в основном эксперименте.
Предварительно всем животным вводят адыовант Фрейнда.
Затем двум животным внутрикожно вводят исследуемый материал или вытяжку из него (в
выбранном растворителе) определенной концентрации.
Для внутрнкожиого введения в основном эксперименте берут самую большую концентрацию
исследуемого материала, которая не вызывает выраженных изменений кожи и не оказывает общего
отрицательного воздействия на животных.
Выборочно проводят аппликации разных концентраций исследуемого материала или вытяжек из
него на кожу бока дополнительно еще трем животным. Через 24 ч снимают повязку и образцы и
оценивают состояние аппликационных участков на наличие эритемы и отека в соответствии
с таблицей 6.
Т а б л и ц а 6 —Система классификации реакции кожи
Реакция
Оценка в баллах
Эритема или образование струпа
Отсутствие эритемы
0
Очень слабая эритема (слегка заметная) 1
Заметная эритема2
Умеренная эритема3
Выраженная эритема (ярко-красная) с образованием струпа
4
Образование отека
Отсутствие отека
0
Очень слабый отек (слегка заметный) 1
Заметный отек2
Умеренный отек3
Выраженный отек
4
П р и м е ч а н и я
1Другие возникшие кожные реакции должны быть отмечены в отчете об исследовании.
2 Система оценки степени реакции модифицирована и стандартизована.
Определяют:
а) если возможно, для фазы местного воздействия в основном эксперименте — наивысшую
концентрацию исследуемого материала, которая вызывает легкую эритему, но не оказывает общего
отрицательного влияния на органи зм животных:
б) для фазы провокационной пробы в основном эксперименте —наивысшую концентрацию,
которая не вызывает эритемы.
6.2.4.3 Основной эксперимент
6.2.4.3.1 Внугрикожная предварительная сенсибилизация
Каждому животному в выстриженные участки кожи (1, 2 и 3) в соответствии со схемой
рисунка 3 проводят парные внугрикожные инъекции по 0,1 мл нижеперечисленных растворов:
- смесь адьюванта Фрейнда с выбранным растворителем в соотношении К/ V - 50/50. Раствори телем
может быть вода или физиологический раствор (в соответствии с Государственной Фармако пеей
СССР, Британской Фармакопеей, Фармакопеей США) для водорастворимых материалов. Для
нерастворимых в воде материалов примерный список растворителей приведен в приложении Б (Б.2.10);
- исследуемый материал или вытяжку из него в концентрации, которая определена в предвари
тельном эксперименте; контрольным животным вводят только растворитель;
12